Popis vyšetření: KOKAIN

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

methylbenzoylekgonin, benzoylmethylekgonin, Coke, Crack, Dama Blanca, Erythroxylon Coca, Free Base, Gold Dust, Liquid Lady, Nose Candy, Rock, Snow, Toot, White Lady

methyl(1R,2R,3S,5S)-3-(benzoyloxy)-8-methyl-8-azabicyclo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Preanalytická fáze:

Stanovení v moči, případně ve slinách nebo vlasech. Vzorky je lépe skladovat v lednici i když uváděná stabilita při 20 – 25 °C je 1 týden, při 4 – 8 °C 3 týdny. Při zamrazení na -20 °C je stabilita 8 týdnů.

Poznámky k analytické metodě:

Imunochemické postupy jsou nejběžnější. Specifita imunometod je 98,9 % FPIA, 99,3 % EMIT a 99,6 % RIA
a kinetická interakce latexových mikročástic. Zejména jednoduché kvalitativní testy s jednoúčelovými proužky. Používá se enzymová imunoanalýza (ELISA i EMIT), fluorescenční homogenní polarizační technika FPIA (používá se také stopped flow varianta), radioimunoanalýza a LIA.
ELISA na mikrotitračních destičkách se používá pro stanovení ve slinách. Reprodukovatelnost podle koncentrace je CV 12 – 16 % a mez detekce je 15 µg/l. Dosažená specifita je 92,2 % a specifita 84,7 %.
Pomocí EMIT se detekuje hlavní metabolit kokainu benzoylekgonin. Mezidenní reprodukovatelnost CV je 1,0 – 1,5 %. Další imunometodou je sledování kinetické interakce latexových mikročástic v roztoku.
FPIA má detekční limit 30 µg/l, reprodukovatelnost v sérii CV 2,2 – 3,0 %, mezi sériemi 3,2 – 5,5 %. SF-FPIA má detekční limit 5 µg/l, reprodukovatelnost v sérii CV 1,9 – 3,6 %, mezi sériemi 2,4 – 3,4 %, výtěžnost 98,4 –
101,2 %.
Jednoúčelové imunochemické proužky k průkazu kokainu jsou levné a poměrně rozšířené. Používají imunochromatografický princip. Kontrolní proužek je tvořen kozí protilátkou proti myšímu IgG. Detekční monoklonální myší protilátka je značená koloidním zlatem. Reakce probíhá ve fosfátovém a TRIS pufru. Kokain reaguje na albuminovém nosiči. Citlivost metody je 300 µg/l, tedy asi 20-krát vyšší než u kvantitativních testů.

Z chromatografických technik se využívá TLC, GC/MS a HPLC.
TLC na silikagelu používá pufr chloroform-izopropylalkohol 9:1, který má pH 9,5.
Gradientová GLC pracuje v rozsahu 100 – 280 °C s gradientem 8 °C/ min a připojeným hmotnostním detektorem. Mez detekce pro benzoylekgonin byla 0,3 mg/l.
HPLC lze také použít při stanovení kokainu.

Kapilární elektroforéza umožňuje stanovit kokain vedla řady dalších drog.

Významné interference:

Výsledky stanovení kokainu v moči zvyšují: benzoylekgonin, čaj, etanol, klozapin, metylekgonin, aj.