Popis vyšetření: Protilátky vůči HELICOBACTER PYLORI

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

H. pylori protilátky, Hp protilátky; Helicobacter pylori antibodies, H. pylori antibodies, Hp Abs; Campylobacter pylori antibodies

Preanalytická fáze:

Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (případně ve stolici). Stabilita vzorku při 2 – 8 °C 2 – 7 d (ve stolici i za laboratorní teploty 3 d), při -20 °C 6 – 12 měsíců. Silně hemolytické, ikterické a lipemické vzorky jsou pro analýzu nevhodné.

Poznámky k analytické metodě:

ELISA IgG na sendvičovém principu probíhá v mikrotitračních destičkách potažených Helicobacter pylori. Po navázání stanovované protilátky (60 min, 18 – 25 °C) a promytí (3x) se váže ve tmě na druhý paratop lidský IgG, značený POD (30 min, 18 – 25 °C). Po promytí (3x) se enzym detekuje reakcí (20 min, 18 – 25 °C) s tetrametylbenzidinem  ve tmě, která se zastaví stop činidlem (0,5 M H2SO4). Měření se provádí do 60 min při 450/600-650 nm. Rozsah metody je na základě čtyřbodové kalibrace 1 – 150 kU/l. Uváděná senzitivita je > 95 % a specifita > 95 %. Preciznost v sérii je 8,5 %, mezi sériemi 6,3 %; linearita ředění 82 – 118 %, zpětný výtěžek 90 – 93 %. Stanovení neovlivňuje hemoglobin do 8 g/l, bilirubin do 513 µmol/l a triacylglyceroly do 5,65 mmol/l.

ELISA IgA na sendvičovém principu probíhá v mikrotitračních destičkách potažených Helicobacter pylori. Po navázání stanovované protilátky (60 min, 37 °C) a promytí (3x) se váže ve tmě na druhý paratop protilátka vůči lidskému IgA, značená POD (30 min, laboratorní teplota). Po promytí (3x) se enzym detekuje reakcí (15 min, laboratorní teplota) s tetrametylbenzidinem  ve tmě, která se zastaví stop činidlem. Při velkém množství protilátky může vznikat sraženina a vzorek se musí ředit 2x. Měření se provádí do 30 min při 450/620 nm. Rozsah metody je na základě čtyřbodové kalibrace 5 – 150 kU/l. Uváděná senzitivita je 90 % (analytická citlivost 5 kU/l) a specifita > 95 %. Preciznost v sérii je 5,9 – 7,2 %, mezi sériemi 6,7 – 9,6 %. Stanovení neovlivňuje hemoglobin do 10 g/l, bilirubin do 342 µmol/l a triacylglyceroly do 22,6 mmol/l.

ELISA IgM na sendvičovém principu probíhá v mikrotitračních destičkách potažených Helicobacter pylori. Po navázání stanovované protilátky (60 min, 18 – 25 °C) a promytí (3x) se váže ve tmě na druhý paratop lidský IgM, značený POD (30 min, 18 – 25 °C). Po promytí (3x) se enzym detekuje reakcí (20 min, 18 – 25 °C) s tetrametylbenzidinem  ve tmě, která se zastaví stop činidlem (0,5 M H2SO4). Měření se provádí do 60 min při 450/600-650 nm. Rozsah metody je na základě čtyřbodové kalibrace 1 – 150 kU/l. Uváděná senzitivita je > 95 % a specifita > 95 %. Preciznost v sérii je 8,1 %, mezi sériemi 11,3 %; linearita ředění 77 – 125 %, zpětný výtěžek 88 – 107 %. Stanovení neovlivňuje hemoglobin do 8 g/l, bilirubin do 513 µmol/l a triacylglyceroly do 5,65 mmol/l.

Významné interference:

Hodnoty snižují: deficit protilátek po akutní infekci, imunosuprese, starší věk, antibiotika, inhibitory protonové pumpy, vizmut.

Hodnoty zvyšují: přítomnost mateřských protilátek u dětí do jednoho roku.