RBP, retinol binding protein

Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (antikoagulans heparinát lithný nebo sodný nebo EDTA). Maximální čas od získání do zpracování vzorku jsou 2 h při laboratorní teplotě.
Stabilita: 4 – 8 °C 7 dní, -20° C 3 měsíce, opakované zamrazení se nedoporučuje. Stanovení ruší lipémie, vzorky nutno centrifugovat 10 min při 15000 g. Stanovení lze provádět také v moči (ELISA).
Intraindividuální variace je 3,2 %, interindividuální 11,4 %.

Z imunochemických metod se nejvíce používá nefelometrie nebo turbidimetrie.

Před turbidimetrickou detekcí se provádí ve fosfátovém pufru v přítomnosti polydokanolu (substituovaný oligoetanol) precipitace polyklonální králičí protilátkou vůči RBP. Intenzita zákalu odpovídá koncentraci RBP ve vzorku. Detekční limit metody je 1,3 mg/l, měřící rozsah 10 – 130 mg/l, po ředění do 208 mg/l; celková reprodukovatelnost má CV 1,5 – 4,0 %. Efekt nadbytku antigenu se do 553 mg/l neprojevuje.
Při nefelometrii 840 nm lze stanovit koncentrace v rozsahu 12 – 175 mg/l s opakovatelností CV 2,0 – 3,4 %, reprodukovatelnost mezi sériemi je 2,5 – 4,3 %. Výtěžnost je 98,9 – 101,2 %. Detekční limit při chybě 30 % je 12 mg/l.
Stanovení RBP lze provádět také sendvičovou heterogenní imunoanalýzou soupravou ELISA v mikrotitračních destičkách. V prvním kroku se váže stanovovaný RBP na polyklonální králičí protilátku zakotvenou v jamkách. Po vypláchnutí se přidá druhá protilátka značená peroxidázou. Po opětném vypláchnutí pak substrát (tetrametylbenzidin). Reakce se zastaví okyselením (0,3 M kyselina sírová) a barevná reakce se detekuje bichromaticky při 450 nm proti 620 nebo 690 nm. Stabilita výsledného zbarvení je 2 h. Detekční limit metody je 0,9 µg/l. Reprodukovatelnost CV v sérii 5,0 %, mezi sériemi 9,7 – 9,8 %.

Standardní referenční materiál nebyl v roce 2010 ještě k dispozici.

Výsledky stanovení RPB snižují: alkoholismus, bilirubin (1026 µmol/l -1 %), citronan, deficit zinku, hemoglobin (10 g/l -4 %), malnutrice, ztráta hmotnosti, aj.
Výsledky stanovení RBP zvyšují: diurnální variace, kortikoidy, těhotenství, toluen (při stanovení v moči), aj.