4-(2-aminoethyl)-2-methoxyfenol, 3-O-methyldopamin, 3-methoxy-4-hydroxyfenylethylamin; 3-methoxytyramine, 3-MT

Stanovení se provádí v moči, která je stabilní při 25 °C 1 d, při 4 °C 5 d, při -20 °C 6 měsíců.

HPLC v izokratickém režimu s elektrochemickou detekcí (potenciál 780 – 840 mV) je určena ke stanovení metanefrinu, normetanefrinu a 3-methoxytyraminu v moči. Vázané metanefriny se uvolní kyselou hydrolýzou (2 M HCl). Po naředění neutralizačním pufrem se nastaví pH vhodné pro následnou extrakci do pevné fáze (2 M NaOH). Po vymytí elučním pufrem se přidá před chromatografií kyselina octová. Metoda je použitelná v rozsahu 5 – 5000 µg/l. HPLC trvá 14 min (průtok 1,2 ml/min, teplota 25 °C). Preciznost v sérii je < 4 %, mezi sériemi < 6 %; zpětný výtěžek přibližně 85 %.

LC-MS/MS předchází extrakce do pevné fáze, kterou lze provádět současně u všech šesti analytů. Kapalinová chromatografie trvá 4 min a umožňuje stanovit adrenalin, noradrenalin, dopamin, metanefrin, normetanefrin a 3-methoxytyramin. Jako vnitřní standardy se používají dopamin-D4, noradrenalin-D6, adrenalin-D6, 3-methoxytyramin-D4, normetanefrin-D3, metanefrin-D3 (rozpuštěné v matrici čisté moče). Po kyselé hydrolýze vznikají při extrakci difenylboronátové komplexy, které se snadno zachycují na extrakční koloně C18, v alkalickém prostředí se snadno rozrušují a metanefriny se promývají metanolem s pufrem NH₄Cl-NH₄OH a eluují 5 % kyselinou mravenčí. Chromatografie při 40 °C na pentafluorfenylové koloně (zrno 3 µm) s mobilní fází 0,2 % vodní kyselina mravenčí s metanolem. Hmotnostní spektrometrie používá teplotu plynu 325 °C při napětí v kapiláře 3000 V; sledují se 3-methoxytyramin m/z 151,1 a fragmenty 119 a 91,1 spolu s vnitřním standardem 3-methoxytyramin-D4 m/z 155,1 a jeho fragmentem 95,1. Kalibrace pro 3-methoxytyramin je 0 – 3000 µg/l. Preciznost v sérii 0,2 – 1,1 %, mezi sériemi 0,3 – 3,6 %; zpětný výtěžek 95,7 – 102,9 %.

V dostupné literatuře nejsou uvedené.