pepsinogen A, propepsin, PGI, PGA

Pacient by měl lačnět 10 – 12 h a nebrat antacida. Léky ovlivňující kyselost žaludeční š
eávy a gastrointestinální mobilitu by měly být vysazeny alespoň 48 h před odběrem. Venózní krev se odebírá ráno nalačno. Stabilita v séru při 15 – 25 °C 4 d. Jiný pramen uvádí nutnost zmrazit vzorek ihned po centrifugaci a dopravovat na suchém ledu, třetí pramen dovoluje skladování při 2 – 8 °C 7 d. Stanovení se provádí také v plazmě (antikoagulans EDTA nebo citrát). Moč se odebírá jako jednorázový ranní vzorek.

RIA postup se už v současné době nepoužívá.

ELISA kvantitativně měří pepsinogen I jednostupňovou sendvičovou technikou pomocí dvou monoklonálních protilátek vůči odlišným epitopům lidského pepsinogenu I bez křížové reakce s pepsinogenem II. Vzorky séra obsahující pepsinogen I se pipetují do jamek mikrotitračních destiček, potažených streptavidinem. Současně se přidává biotinylovaná protilátka a konjugát druhé protilátky s křenovou peroxidázou. Reaktanty se inkubují 1 h za laboratorní teploty. Nenavázané proteiny a volný konjugát se 5x vymyjí a přidá se tetrametylbenzidin a H₂O₂. Po inkubaci 20 min za laboratorní teploty ve tmě se reakce zastaví 0,5 M H₂SO₄ a měří absorbance vertikální fotometrií při 450 nm do 10 min na základě šestibodové kalibrace. Signál je přímo úměrný množství stanovovaného enzymu. Rozsah měření je 0,5 – 300 µg/l (při vyšších koncentracích se vzorek ředí diluentem). Analytická citlivost je 0,1 µg/l, funkční citlivost 0,5 µg/l. Preciznost v sérii je 4,8 – 5,3 %, mezi sériemi 2,7 – 6,9 %; linearita ředění 93 – 107 %, zpětný výtěžek 88 – 103 %. Efekt nadbytku antigenu se neprojevuje do 10000 µg/l.

Chemiluminiscenční imunoanalýza v sendvičovém uspořádání používá myší monoklonální protilátku vůči pepsinogenu I, zakotvenou na paramagnetických částicích ke které se přidává ředěný standard nebo vzorek. Po inkubaci a promytí fosfátovým pufrem se přidá myší monoklonální protilátka vůči pepsinogenu I značená akridiniumkarboxamidem. Po promytí fosfátovým pufrem se přidá 1,32 % peroxid vodíku a 0,35 M roztok hydroxidu sodného. Vzniklá chemiluminiscence je přímo úměrná koncentraci pepsinogenu I a sleduje se fotonásobičem při 429 nm.Metoda dovoluje měřit vzorky v rozmezí koncentrací 1 – 200 µg/l (vyšší koncentrace se ředí manuálně 5x, resp. 10x). Preciznost v sérii 1,9 – 3,3 %, celkově 2,6 – 4,1 %. Zpětný výtěžek je 93,5 – 114,5 %. Analytická senzitivita (2 SD nulového blanku) je 1,0 µg/l. Při koncentraci 1527 µg/l nebyl zaznamenán detekovatelný přenos. Heterofilní protilátky v lidském séru mohou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v reagenciích, čímž způsobuji interferenci při imunoanalýze.

Hodnoty snižuje: betazol hydrochlorid, vagotomie, achlorhydrie, perniciózní anémie, atrofická gastritida, hypopituitarismus, vředová choroba, Addisonova nemoc, myxedém, nádor žaludku, resekce žaludku.

Hodnoty zvyšuje: kouření, hemodialýza, gastrinom, zvýšený výdej žaludeční š
eávy.