porphyrins

Stanovení se provádí v plazmě (antikoagulans heparin), moči a stolici. Odběr krve je třeba provádět ráno nalačno a vyloučit hemolýzu. Stabilita v plazmě 14 d při 2 – 8 °C.

Vzorek moče je třeba uchovávat v temnu (alobal) při pH 6 – 7 (NaHCO₃), stabilita 4 – 7 d při 4 – 8 °C, 14 – 28 d při -20°C. Jiné prameny uvádí stabilitu 4 – 30 d při 15 – 25 °C a pH 6 – 7. U akutních stavů se vyšetřuje čerstvá moč. Při vyšetření sbírané moči vyloučit po tři dny rostlinnou stravu.

Odebranou stolici chránit před světlem a uchovávat v chladničce. Stabilita 3 d při 4 °C, 30 d při -20 °C. Po tři dny zachovat dietu k vyloučení krve ve stolici.

Stanovení v moči: ředěná moč (10x 0,5 M H₂SO₄) se v kyvetě spektrofotometru změří v intervalu 350 – 450 nm. Změří se výška píku (v cm) a násobí faktorem, odpovídajícím průměrné směsi porfyrinů (např. 824). Takto se získá koncentrace porfyrinů v µg/l. Rozsah a linearita metody 80 – 3600 µg/l. Preciznost v sérii je 7 %, mezidenní 3 %. Mez detekce 41 µg/l, mez stanovitelnosti 82 µg/l.

Stanovení ve stolici: přibližně 250 mg stolice se naváží s přesností na 0,1 mg (na alobalu). Po vysušení 24 h v peci se znovu přesně zváží. Část stolice se vloží do centrifugační kalibrované zkumavky a suspenduje v koncentrované HCl, extrahuje éterem a zředí destilovanou vodou. Po centrifugaci se změří objem vodné fáze a poté se v kyvetě spektrofotometru změří její absorbance v intervalu 350 – 450 nm. Po hmotnostní korekci suché na vlhkou stolici a se znalostí objemu vodné fáze absorbujícího roztoku lze po korekci experimentálním faktorem vypočítat koncentraci porfyrinů ve stolici v µmol/kg. Rozsah a linearita: 30 – 2400 mmol/kg. Preciznost mezidenní je 7,3%.

Fluorimetrické stanovení používá jako standard protoporfyrin IX. Vzorek (např. tkáňový extrakt) se rozpouští v 1 M HCl a měří na fluorimetru (excitace 400±15 nm, emise 600±20 nm). Rozsah kalibrace je 5 – 50 µmol/l protoporfyrinu IX.

Snížené hodnoty v moči a stolici: stání na světle při pokojové teplotě.

Zvýšené hodnoty v plazmě: po požití alkoholu, hemolýza, otrava olovem, nedostatek železa, ledvinová insuficience.

Zvýšené hodnoty v moči: hemoglobin, menstruace, těhotenství, hemolytická anémie, cirhóza jater, obstrukční ikterus, Hodginova nemoc, pelagra; léky: aminofenazon, barbituráty, biseptol, dapson, deriváty pyrazolonu, estrogeny, etanol, fenazopyridin, fenylbutazon, fenylhydrazin, glutetimid, griseofulvin, hypnotika, chloralhydrát, chlorochin, chlorpropamid, karbamazepin, kyselina aminosalicylová, meprobamat, metyldopa, morfin, noxyron, pentazocin, perorální antikoncepce, progesteron, prokain, pyrazinamid, rhytmochin II, septrin, sulfonamidy, sulfonylurea, sumetrolim, supristol, tetracyklin, tolbutamid.

Zvýšené hodnoty ve stolici: hemolytická anémie, choroby jater, intoxikace olovem.