Biocoryl, Novocainmidum, Novocamid, procainamide, procaine amide, Procanbid, Procan-SR, Pronestyl, Pronestyl SR, Retard, Rhythmin

4-amino-N-(2-diethylaminoethyl)benzamid

Stanovení se provádí v séru, případně v plazmě (koagulant EDTA, heparin, oxalát, citronan). Stabilita vzorku (plazma, sérum): 20 – 25 °C: 8 h; 2 – 8 °C: 1 – 2 týdny; -20 °C: 1 měsíc.
Doporučený odběr je 1 – 2 h při podávání p.o., 30 min po aplikaci i.v. Biologický poločas je 3 – 4 h. Možné ztráty vazbou na separační gely. Ruší hemolýza, ikterus, chylozita, pokud se analýza neprovádí metodami GLC nebo HPLC.

Protože v rámci soudní toxikologie se prokainamid vyšetřuje jen vzácně kvalitativně, provádí se v praxi pouze kvantitativní vyšetření. Původní klasické fotometrické a fluorimetrické metody byly nahrazeny specifičtějšími postupy.

Klasický fotometrický postup začínal extrakcí léku ze séra, prokainamid byl diazotován s kyselinou sírovou
a N-1-naftyletylendiaminem.
Fluorimetrická metoda umožnila stanovit vedle sebe prokainamid a N-acetylprokainamid (NAPA), když po jejich extrakci do organické fáze byly reextrahovány do 0,1 M HCl. Fluorescence NAPA byla měřena při excitační vlnové délce 288 nm a emisní vlnové délce 354 nm. Pak se vzorek alkalizoval 0,1 M NaOH a fluorescence prokainamidu se měřila při excitační vlnové délce 298 nm a emisní vlnové délce 354 nm.

Před plynovou chromatografií byly NAPA a prokainamid extrahovány do metylenchloridu nebo chloroformu. Po odpaření rozpouštědla byl lék znovu rozpuštěn v malém množství metanolu. GLC se provedlo na koloně 3% OV-17 při teplotě 210 až 250 °C za 2 min. K detekci se použil plameno-ionizační detektor. Celá analýza je ukončena za 6 min. Reprodukovatelnost v sérii CV 2,3 – 7,7 %, mezi sériemi 1,9 – 4,7 %; výtěžnost 108 –
110 %.
Před HPLC byly NAPA a prokainamid extrahovány do metylenchloridu nebo chloroformu. K dělení došlo na reverzní fázi s použitím směsi acetátového pufru s acetonitrilem jako mobilní fáze. Detekce se prováděla při 215, 254, nebo 280 nm. Takto lze prokázat vedle sebe NAPA i prokainamid. Linearita metody 2,1 – 85 µmol/l. Mez detekce 0,4 µmol/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 1,5 %, mezi sériemi 3,9 %, výtěžnost 87 – 107 %.

Kompetitivní EMIT využívá soutěže prokainamidu ze vzorku a konjugátu prokainamidu s glukóza-
6-fosfátdehydrogenázou o vazebná místa na protilátce. Enzymová značka je v imunokomplexu inhibována. Čím více léčiva je ve vzorky, tím méně konjugátu se naváže a měřená aktivita enzymu bude vyšší. Aktivita enzymu se sleduje při 340 nm přeměnou NAD⁺ na NADH. Linearita 4,23 – 68 µmol/l. Mez detekce 1,06 µmol/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 0,7 – 5,8 %, mezi sériemi 1,7 – 4,5 % Nelze stanovit NAPA i prokainamid současně.
FPIA využívá kompetice mezi léčivem ze vzorku a léčivem označeným derivátem fluoresceinu o vazebná místa na protilátce. V imunokomplexu má fluorescein omezenou pohyblivost a vyšší emisi polarizovaného světla. Množství konjugátu v imunokomplexu je tím nižší, čím je více léčiva ve vzorku, tedy měřený signál je nepřímo úměrný koncentraci prokainamidu ve vzorku. Reakční čas je 10 min. Mez detekce 1,06 µmol/l. Linearita 8,5 – 85 µmol/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 3,51 – 4,26 %, mezi sériemi 1,17 – 1,51 %, celková preciznost 4,1 – 5,0 %; výtěžnost 96,8 – 104,1 %.
Je popsáno také RIA stanovení, kde je detekce 4,25 µmol/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 2 %, mezi sériemi
5 %.

Většina prací uvádí dobrou korelaci mezi EMIT, FPIA, GLC a HPLC.

Jako srovnávací metoda se používá obvykle HPLC. Standardní referenční materiál není uveden. College of American Pathologists předpokládá preciznost CV < 6 % při stanovení léku v terapeutickém rozmezí.

Výsledky stanovení prokainamidu snižují: EDTA (některé metody), hemolýza (hemoglobin 10 g/l), aj.
Výsledky stanovení prokainamidu zvyšují: bilirubin (510 µmol/l), lipémie (5 g/l), aj.