Urát, 8-hydroxyxantin, purin-2,6,8-triol, purin-2,6,8(1H,3H,9H)-trion, 2,6,8-trioxypurin, 2,6,8-trioxopurin,
2,6,8 trihydroxypurin,
uric acid, uric oxide, lithic acid

7,9-dihydro-1H-purin-2,6,8(3H)-trion

Stanovení se provádí v plazmě, séru a moči. Výsledky v plazmě jsou v průměru o 11,8 µmol/l vyšší než v séru. Při analýze plazmy se jako antikoagulant nesmí používat EDTA, citrát ani oxalát (inhibují urikázu používanou při enzymatickém fotometrickém stanovení - způsobují falešně nižší výsledky); tento enzym je dále inhibován fluoridem sodným, kyanidem a formaldehydem. Lze použít heparinát lithný. Opakované zamrazení vzorku nevadí. Hemolýza neruší při enzymové metodě do koncentrace hemoglobinu 3,5 g/l, ruší ikterus.
Moče je nutné upravit na hodnotu pH > 8,0. Vzorek moče je nutné alkalizovat, aby nevykrystalovaly uráty. Takto upravená moč je stabilní za laboratorní teploty 3 dny.

Stabilita sérum: 3 dny při 18 - 26 °C, 3 – 7 dní při 2 - 8 °C, 6 – 12 měsíců při -20°C. Stabilita moč: 3 – 4 dny při 18 - 26 °C, 1 týden při 2 - 8 °C, 4 týdny při -20°C.

Stanovení ovlivňuje fyzická zátěž, věk, nadmořská výška a dieta.

První analytickou metodou byla redukce fosfowolframové kyseliny na wolframovou modř (fotometrie při 650 až 700 nm) v alkalickém prostředí uhličitanu vápenatého (1912), přičemž kyselina močová se oxidovala na allantoin. Bílkoviny bylo nutné předem vysrážet a kyselinu močovou z filtrátu izolovat jako stříbrnou sůl. Metoda byla dále upravována tak, že se izolovala hořečnatá, amonná, mědná nebo mědnatá sůl. Použití kyanidu zvýšilo citlivost metody, stabilizovalo konečné zbarvení reakčního produktu a eliminovalo potřebu izolace kyseliny močové z filtrátu. Precipitace bílkovin se prováděla wolframovou, trichloroctovou nebo fosfowolframovou kyselinou, teplem nebo filtrací přes membránu. Jiná oxidační činidla obsahovala arsenowolframovou, arsenofosfowolframovou, arsenomolybdenovou kyselinu, ferrikyanid draselný nebo uranyl acetát. Ke zlepšení specifity oxidace byla kyselina močová adsorbována na iontově-výměnné koloně a N-etylmaleimid se přidal, aby se vyloučila interference chromogenů obsahujících sulfhydrylovou skupinu.

Použití urikázy významně zvýšilo specifitu metody. Tato metoda je založena na oxidaci kyseliny močové urikázou na allantoin a peroxid vodíku. Allantoin, na rozdíl od kyseliny močové, neabsorbuje při 290 – 293 nm (pH ≥ 7), resp. 283 nm (pH < 7). Fotometrické měření se provádělo před a po působení urikázy. The Centers for Disease Control navrhlo jako referenční metodu pro stanovení v séru: vysrážení bílkovin kyselinou trichloroctovou, aby se eliminoval vysoký blank. Následně se sledovala E.P. oxidace kyseliny močové bakteriální urikázou o vysoké čistotě jako pokles absorbance při 283 nm. Preciznost se pohybovala od 2,6 % (177 µmol/l) do 1,5 % (584 µmol/l). Metoda je lineární do 1180 µmol/l. Výtěžnost je od 99 do 101 %. Významnější interference se projevovala pouze u guaninu a xanthinu. Malé interference také způsobuje EDTA
a NaF. Reakci lze provádět jak v režimu E.P., tak kineticky.
Je možné také kvantifikovat vzniklý peroxid vodíku po reakci s o-dianisidinem při 530 nm.
Jiným příkladem je reakce peroxidu vodíku s 3-metyl-2-benzothiazolinonem a N,N-dimetylanilinem
v přítomnosti peroxidázy, kdy vzniká modré indaminové barvivo, jehož absorbance se měří při 600 nm.
Peroxid vodíku také reaguje s 3,5-dichlor-2-hydroxybenzensulfonovou kyselinou a 4-aminofenazonem
v přítomnosti peroxidázy za vzniku červeného chinoniminového barviva, jehož absorbance se měří při 520 nm, aby se eliminoval vliv hemolýzy, bilirubinu a zákalu. Reakce má dobrou reprodukovatelnost. Interference bilirubinu je eliminována přidáním ferrikyanidu draselného. Askorbát oxidáza zabraňuje interferenci kyseliny askorbové. 2,4,6-Tribromfenol lze také použít k reakci se 4-aminofenazonem, kdy se absorbance produktu měří při 492 nm.
Jestliže se jako akceptor kyslíku použije 3,7-diamin-5-fenothiazin thioninový derivát lze provádět měření při
600 nm, kdy neruší hyperbilirubinémie.
Další barevnou reakcí je využití formaldehydu (Kageyamova metoda), který vzniká z peroxidu vodíku a metanolu za katalýzy enzymem katalázou. Formaldehyd reaguje s acetylacetonem a amoniakem za vzniku žlutého
3,5-diacetyl-1,4-dihydrolutidinu, který se měří při 410 nm.
Peroxid vodíku také může za působení katalázy reagovat s etanolem na acetaldehyd, který se oxiduje na acetát pomocí NAD⁺ a při 340 nm se sleduje vznik redukovaného NADH.

Reflexní fotometrie používá celulózovou matrici obsahující urikázu, peroxidázu a kyslíkový receptor 3-metyl-
2-benzthiazolinonhydrazon hydrochlorid (MBTH). Kyselina askorbová při reakci ruší, proto je třeba sérum naředit.
Urikázu a peroxidázu lze použít i s 3,5-dichlor-2-hydroxybenzensulfonovou kyselinou a 4-aminofenazonem, kdy vzniká červené chinoniminové barvivo.
Třetí typ proužků opět používá urikázu a peroxidázu avšak s 2,4,6-tribromfenolem a 4-aminofenazonem.

Koncentrace kyseliny močové v séru nebo moči je úměrná rychlosti spotřeby kyslíku při urikázou katalyzované oxidaci a může být měřena Clarkovou polarografickou elektrodou.

Coulometrická titrace měří v séru celkové množství látek redukovaných jodem před a po reakci s urikázou. Vhodná instrumentace není běžně dostupná. Metoda má SD ±5,39 µmol/l v intervalu 142 – 684 µmol/l
a výtěžnost 98,2 – 100,3 %.

HPLC pro stanovení v séru nebo moči používají buď reverzní fáze a detekce při 235 nebo 280 nebo 293 nm, případně separace na ionexu a ampérometrické měření v elektrochemickém detektoru. Citlivost ampérometrického detektoru je 5,9 µmol/l. Interferují pouze metabolity teofylinu‚ metylmočová kyselina). Reprodukovatelnost mezi dny je CV 1 – 2 %. Metoda je lineární v rozsahu 59 – 1180 µmol/l.

Referenční (definitivní) metodou je izotopová diluce s hmotnostní spektrometrií uvedená National Institute of Standards and Technology v roce 1990. Známá navážka [1,3-¹⁵N₂] kyseliny močové byla přidána k navážce séru. Po promíchání se směs nanesla na anexovou pryskyřici a izolovaná kyselina močová se převedla na tetrakis(terc.butyldimethylsilyl) derivát. Ten se nastříknul do plynového chromatografu s nízkou rozlišitelností
a prošel do magnetického sektoru hmotnostního spektrometru. Sledovalo se zastoupení [M-terc.butyl]⁺ iontů 567 a 569. Preciznost měření byla CV 0,34 – 0,42 %, zatímco vychýlení bylo 0,08 – 0,14 %.

V současnosti laboratoře používají výhradně urikázové metody. Doporučené jsou enzymové metody kromě postupu podle Kageyamy.

Certifikovaný referenční materiál nese označení SRM 909 a,b (Level 1, Level 2) NIST, USA.

College of American Pathologists v roce 2001 požadovala preciznost pro urikázovou metodu < 3 % při koncentraci kyseliny močové 295 µmol/l. Akceptovatelná přesnost (CLIA-88) je ±17%. Intraindividuální variace pro kyselinu močovou v krvi je přibližně 9 %. Analytická preciznost odvozená ze studie biologické variace musí být 4,3 %, aby celková chyba nebyla větší než 12 %.

Toleranční limit EHK SEKK: sérum 14 %, moč 26 %; CV pro vnitřní kontrolu kvality: 6 %, teoretický toleranční limit: 13,8 %.

Koncentraci kyseliny močové v séru nebo plazmě snižují: alanin, albuterol, aldakton, allopurinol, amiclaran, aspirin, azathioprin, azlocillin, bilirubin > 85,5 µmol/l, benzbromaron, benziodaron, cefotaxim, citrát (-22 %), dikumarol, dipyron, dobutamin, EDTA ( 11 %), fenylbutazon (vysoké dávky), fluoridy (-22 %), formaldehyd, griseofulvin, hemodialýza, hemoglobin, hydrochlorothiazid, chlorothiazid, chlorpromazin, chlorprothixen, indometacin, kanolový olej, klofibrát, kontraceptiva, kortikosteroidy, kortikotropin, kouření, kyanidy, lipémie (až
-13 %), metotrexát, oxyfenbutazon, prednisolon, probenecid, radiografická činidla, spironolakton, těhotenství (do 16. týdne), vegetariánská dieta, verapamil, vitamin C, xantin (až -40 %), aj.
Koncentraci kyseliny močové v séru nebo plazmě zvyšují: acetaminofen, acetazolamid, acetoacetát, adrenalin, aldatense, aldesleukin, p-aminofenol, aminothiadiazol, ampicillin, anabolické steroidy, angiotensin, aspirin, atenolol, azathioprin, azathymin, azauridin, basiliximab, bendroflumethiazid, benetazon, bisoprolol, bumetanid, busulfan, capreomycin, cis-platina, cvičení, cyklosporin, cystein, cystin, cytarabin, defibrotid, diapamid, diazoxid, dichlorfenamid, didanosin, dideoxyinosin, dithiazem, dopamin, doxorubicin, edecrin, ergothionin, etanol, ethakrynová kyselina, ethambutol, etoposid, fenylbutazon (nízké dávky), fruktóza, furanthril, furantral, furosemid, hladovění, hydrochlorothiazid, hydroxymáselná kyselina, hydroxyurea, hypoxantin, chlorambucil, chlormethin, chloroform, ibuprofen, indapamid, kalcitriol, kancerostatika, káva, kvasnice, kyselina nikotinová, kyselina thiomočová, laktát, lipovitan, manóza, mechloretamin, merkaptopurin, methicillin, metolazon, mitomycin, niacin, niacinamid, nikotinát hlinitý, nutramin, obezita, orotát draselný, oxytetracyklin, paralen, pelentan, pentostatin, plegomazin, prokain penicilin G, propranolol, propylthiouracil, proteinová dieta, purinová dieta, pyrazinamid, rifampin, rtuťová diuretika, scutamil C, sorbit, spasmoveralgin, sulfanilamid, superanabolon, těhotenství (poslední týdny), tensamin, teofylin, tetracyklin, thiamin, thiazidy, thionein, thiotepa, threonin, tomanol, triamteren, trimecryton, tuková dieta, tyramin, tyrosin, urandil, vinkristin, warfarin, xylitol, zidovudin, aj.

Koncentraci kyseliny močové v moči snižují: citrát, formaldehyd, hydroxymáselná kyselina, laktát, prokain penicilin G, trimecryton, urandil, aj.
Koncentraci kyseliny močové v moči zvyšují: acetoacetát, alanin, B-komplex, cvičení, dopamin, edecrin, ergothionin, fenylbutazon, fruktóza, glukóza, glycin, homogentisová kyselina, chlorpromazin, kvasnice, kyselina pyrohroznová, kvasnice, lipovitan, manóza, proteinová dieta, spasmoveralgin, tensamin, thiamin, tomanol, xylitol, aj.