TSH receptor antibodies, thyrotropin receptor antibodies, TRAb, long-acting thyroid stimulator, LATS, thyroid stimulating autoantibodies, Ts antibodies, thyroid stimulating immunoglobulins, TSIG

Odebírá se venózní srážlivá krev. Sérum je stabilní za laboratorní teploty 2 d, při 4 – 8 °C 3 – 14 d, při -20 °C 1 rok.

Radioreceptorová analýza (RRA) je metoda, při které se jako specifické vazebné činidlo užívá tkáňový receptor (tj. buněčná vazebná bílkovina) a jako radioindikátor značený ligand. RRA využívá obecné reakce ligandu s receptorem v kompetitivním uspořádání. Po ustavení termodynamické rovnováhy je nutno z reakční směsi odstranit nenavázaný ligand. Měřením radioaktivity vázané frakce radioindikátoru vyhodnocujeme stejný typ analýzy jako v případě RIA kompetice. Kvantitativní stanovení TRAb je založeno na jejich schopnosti zabránit vazbě značeného TSH na TSH receptor. V prvním kroku se vzorky a standardy inkubují 2 h při 17 – 27 °C s TSH receptorem (třepání), který je ukotven na stěně zkumavky. Po promytí (2x) se přidá hovězí TSH značený ¹²⁵I, který obsadí dosud volné TSH receptory na vnitřní stěně zkumavky (inkubace 1 h při 17 – 27 °C, třepání). Nenavázané ¹²⁵I-TSH se odstraní promytím (3x). Aktivita vázaného ¹²⁵I-TSH se měří gama-počítačem 1 min a velikost signálu je nepřímo úměrná množství TRAb. Rozsah měření na základě šestibodové kalibrace je 0 – 40 U/l. Specifita metody je 99,6 %, senzitivita 98,8 %.

ELISA umožňuje in vitro kvantitativní vyšetření TRAb v séru. Reakční jamky mikrotitračních destiček jsou potažené TSH receptory. V prvním kroku reakce jsou zředěné vzorky sér inkubovány v jamkách 120 min (třepání). V případě pozitivního vzorku se TRAb váží na TSH receptory. Po promytí pufrem (1x) se přidá biotinylovaná monoklonální lidská protilátka vůči TSH receptorům, která obsadí zbylá volná místa TSH receptorů (inkubace 25 min). K detekci navázaných protilátek po promytí (1x) provádí následně inkubace 20 min s enzymovým konjugátem (streptavidin značený peroxidázou), který je schopen vyvolat barevnou reakci, následně po promytí pufrem (3x), s přidaným tetrametylbenzidinem a H₂O₂. Po 30 min ve tmě se reakce zastaví stop činidlem a intenzita vzniklého zabarvení je nepřímo úměrná množství TRAb. Měření se provádí při 450 nm na základě pětibodové kalibrace v rozsahu 0,08 – 30 U/l. Mez detekce je 0,08 U/l. Celý postup se provádí za laboratorní teploty. Přesnost v sérii 4,2 – 5,5 %, mezi sériemi 8,7 – 8,8 %. Senzitivita: 95 %, specifita: 100 %. Stanovení neručí hemoglobin 5 g/l, bilirubin 342 µmol/l a triacylglyceroly 33,9 mmol/l.

Bioanalýza, která měří schopnost TRAb stimulovat tyroidní buňky při kultivaci je drahá, zdlouhavá a vyžaduje zkušený personál, proto se v rutině nepoužívá.

Hodnoty snižuje propyltiouracyl a metimazol.