Salmonella typhi, Salmonella paratyphi

Odebírá se venosní srážlivá krev nalačno. Následný odběr se provádí do jednoho měsíce. Sérum je stabilní za laboratorní teploty 2 d, při 4 – 8°C 14 d, při -20 °C 1 rok. Opakované rozmrazení se nedoporučuje.

Widalova reakce spočívá ve vyšetření celkových protilátek proti salmonelám v pacientském séru metodou klasické aglutinace. Stanovují se protilátky proti antigenům O (somatické antigeny – lipopolysacharidy buněčné stěny), proti antigenům H (bičíkové antigeny – bílkoviny bičíků) a proti antigenu Vi (kapsulární – povrchový polysacharid). Vzestup titru protilátek proti antigenu O svědčí pro akutní onemocnění. Protilátky proti H antigenům nastupují později, ale přetrvávají déle. Přetrvávání pozitivity protilátek proti antigenu Vi (u Salmonella typhi) upozorňuje na možné bacilonosičství. Tyto protilátky se také objevují po očkování proti břišnímu tyfu.

Při Widalově reakci se často přidává 2-merkaptoetanol, který denaturuje IgM protilátky. Pak dojde k poklesu titru protilátek a zůstává pouze komponenta IgG. Tím se odliší nová infekce IgM od staré infekce IgG.

Test se provádí na destičce se šesti kruhovými reakčními poli: do prvního se pipetuje pozitivní kontrola, do druhého fyziologický roztok, a do dalších polí sérum pacienta. Bičíkové antigeny H se přidají k pozitivní kontrole a fyziologickému roztoku. Do dalších polí se k séru pacienta přidají antigeny O, H (Salmonella typhi), AH a BH (Salmonella paratyphi A, B). Všechna kruhová reakční pole se promíchají (každé separátní tyčinkou). Destička se jemně kolébá a aglutinace se odečítá vizuálně do 1 min. Hodnocení: 0 (žádná aglutinace), 1+ (aglutinace 25 %), 2+ (aglutinace 50 %), 3+ (aglutinace 75 %), 4+ (aglutinace 100 %). Sérum lze také ředit (obvykle 1:20 až 1:320, případně 1:640) a odečítat po 3 min. Widalova reakce je pozitivní, když je titr pro O nebo H antigen > 1:160.

Test ve zkumavce trvá mnohem déle (20 h při 37 °C nebo 4 h při 56 °C + přes noc při 4 °C). Slouží k potvrzení rychlého testu.

paraziti malárie Plasmodium falciparum a Plasmodium malariae.