Popis vyšetření: METAKVALON

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

Aqual, Cateudyl, Citexal, Dormigoa, Dormogen, Dormutil, Dorsedin, Fadormir, Holodorm, Hyminal, Hyminal monohydrochloride, Hypcol, Hypocol, Hyptor, Hyptor base, Ipnofil, Melsed, Melsed HCL, Melsedin, Melsomin, Mequal, Mequin, Metachalon, Metaqualon, Methachalonum, Methaqualon, Methaqualoneinone, Methased, Metolquizolone, Mollinox, Motolon, Mozambin, Nethaqualone, Nobedorm, Noctilene, Normi-nox, Omnyl, Optimil, Optinoxan, Orthonal, Ortonal, Parest, Parminal, Pro-dorm, QZ 2 hydrochloride, Quaalude, Quaalude hydrochloride, Revonal, Rorer 148, Rorer 714, Roulone, Rouqualone, Sindesvel, Somberol, Somnafac, Somnofac, Somnomed, Sonal, Sopor, Sopor hydrochloride, Soverin, TR 495 monohydrochloride, Torinal, Tuazol, Tuazole, Tuazolone
2-methyl-3-(2-methylfenyl)chinazolin-4-on

Preanalytická fáze:

Stanovení v moči. Vzorky je třeba skladovat v lednici při 2 – 8 °C po dobu 5 – 7 dní; delší skladování vyžaduje
-20 °C. Opakované zamrazování vzorků se nedoporučuje. Analýza se provádí 4 – 6 h po aplikaci.
Je vhodné sledovat potenciální pokusy o ovlivnění výsledku (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích látek, či výraznou úpravu pH moče).

Poznámky k analytické metodě:

Původní klasické testy stanovovaly metakvalon po extrakci v UV oblasti, kde má maxima 225, 265, 305
a 316 nm. Mez detekce byla 1 mg/l.
Jednoduchý kvalitativní barevný test lze provést s 2,4,6-triaminopyrimidinem.

Imunochemické postupy jsou nejběžnější. Zejména jednoduché kvalitativní testy s jednoúčelovými proužky nebo pro multidrogový screening. Test prokazuje přítomnost drogy, tj. metadonu v moči. Konjugát (metadon-protein) imobilizovaný v membráně testovací destičky soutěží kompetitivně s metadonem přítomným
v testované moči o možnost navázaní se na omezené množství koloidním zlatem značených protilátek nanesených na začátek testovací membrány. Barevné monoklonální protilátky proti metadonu jsou spolu
s močí posunovány po membráně. Pokud v moči metadon není, dostanou se nenavázané protilátky až k pásu konjugátů v oblasti označené písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh, což znamená negativní výsledek testu. Pokud je v moči metadon přítomný, navážou se na ně protilátky hned na počátku membrány
a k pásu konjugátů se již jako volné nedostanou. V oblasti označené písmenem T proto žádný barevný pás nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu. Podmínkou vydání kvalitativního výsledku testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost barevného kontrolního pruhu v oblasti membrány označené písmenem C (Control region). Ten vytvoří reakce jiného systému antigen/protilátka přidávaného výrobcem do setu. Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl proveden správně a že je funkční, tj. že bylo na testovací destičku naneseno dostatečné množství moče a že se moč dobře nasákla do celé plochy testovací membrány. Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to skenování exponované destičky a uložení vytvořeného obrázku
v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití. Cut-off hodnota proužků je
300 µg/l.
RIA analýza je už historický postup.
Homogenní imunoanalýza EMIT používá jako značku glukóza-6-fosfát dehydrogenázu, která pokud není
v imunokomplexu s myší monoklonální protilátkou oxiduje glukóza-6-fosfát na glukonolakton-6-fosfát
a současně redukuje NAD+ na NADH, což se sleduje při 340 nm. Relativní specifita i senzitivita je 100 %. Reprodukovatelnost měla CV 0,6 – 1,1 %.
ELISA je založena na kompetitivní reakci mezi metakvalonem ze vzorku a metakvalonem značeným křenovou peroxidázou o vazebná místa protilátky, kterou jsou potaženy jamky mikrotitračních destiček. Po promytí se přidá tetrametylbenzidin a výsledné zbarvení se po zastavení reakce sleduje při 450 nm vertikální fotometrií.
Při homogenní metodě KIMS (kinetická interakce mikročástic v roztoku) je metadon vázán přes spojovací bílkovinu na karboxylované polystyrénové částice a polyklonální kozí protilátka volně v roztoku. Po kompetitivní imunoreakci mezi metadonem ze vzorku a konjugátem metadonu se sleduje zákal imunokomplexu. Cut-off semikvantitativního testu je 300 µg/l. Reprodukovatelnost pro cut-off v sérii CV je 1,1 – 2,7 %, mezi dny 3,2 –
4,4 %. Kvantitativní test má limit detekce 19 µg/l, reprodukovatelnost v sérii CV je 3,1 – 5,8 %, mezi dny 4,2 –
7,2 %. Detekční limit metody je 38 µg/l.
Test není vhodný pro soudně lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen vhodnou kvantitativní a specifickou metodou založenou například na principu GC/MS nebo HPLC.

Kvalitativní TLC se provádí po extrakci do éteru na silikagelu a pod ultrafialovým světlem.
Plynová chromatografie začíná extrakcí metakvalonu z alkalického prostředí do éteru a následnou detekcí
s metadon hydrochloridem jako vnitřním standardem pomocí plameno-ionizačního detektoru. Mez detekce je
20 µg/l metakvalonu.
GC-MS postup po extrakci a chromatografii ke kvantifikaci používá ion 250. Reprodukovatelnost v sérii je CV
6,2 – 12,9 %, mezi dny 6,5 – 12,0 %.
Na HPLC koloně je používán jako mobilní fáze acetonitril-voda 26:74 a metakvalon se detekuje při 210 nm.

Významné interference:

Výsledky stanovení metakvalonu v moči zvyšují: 3´-hydroxymetakvalon, 4´-hydroxymetakvalon,
6-hydroxymetakvalon, 2-hydroxymetylmetakvalon, 2´-hydroxymetylmetakvalon, mefenamová kyselina, meklokvalon, neopiátová analgetika, aj.