Barbita, Comizial, Fenilcal, Gardenal, Hysteps, Luminal, Phenemal, Phenemalum, Phenobarb, Phenobarbital, Phenobarbitone, Phenylethylmalonylurea, Solfoton, Stental Extentabs

Stanovení se provádí v plazmě (antikoagulans K2EDTA nebo heparinát lithný či sodný), séru nebo moči.
Stabilita vzorku 20 – 25 °C (sérum, plazma): 1 týden, 4 – 8 °C (sérum, plazma): 4 dny, -20 °C (sérum, plazma): 2 roky.

Imunochemické postupy jsou nejběžnější a mohou být plně automatizované. Používá se EIA, FPIA, chemiluminiscenční imunoanalýza, imunonefelometrie, imunoturbidimetrie, GLC a HPLC.

ELISA na mikrotitračních destičkách potažených polyklonální protilátkou proti fenobarbitalu využívá kompetice fenobarbitalu ze vzorku a fenobarbitalu značeného křenovou peroxidázou o její vazebná místa. Výsledné zbarvení tetrametylbenzidinu se měří při 450 nm. Reprodukovatelnost v sérii je CV 7,67 – 11,7 %.
EMIT používá jako značku glukóza-6-fosfátdehydrogenázu a kompetitivní uspořádání imunochemické reakce. Reprodukovatelnost v sérii CV 1,0 – 2,6 %, mezi sériemi 11 – 19 %; vychýlení -6 až +10 %; výtěžnost 92 –
102 %.
Kapilární elektrochemická enzymová imunoanalýza je heterogenní kompetitivní postup, kdy je oxidovaná primární protilátka připojena kovalentně na vnitřní povrch mikrokapiláry (22 µl). Po kompetici mezi fenobarbitalem ze vzorku a fenobarbitalem značeným ALP se množství enzymového produktu detekuje štěpením p-aminofenylfosfátu na p-aminofenol amperometrickou průtokovou vstřikovací analýzou.
Fluorescein jako marker se používá při homogenní fluorescenční polarizační imunoanalýze (FPIA). Reprodukovatelnost v sérii CV 3,7 %, mezi dny 6,2 %; výtěžnost 90 – 103 %.
Fluorescenční imunoanalýzu lze kombinovat i s vylučovací chromatografií. Po kompetitivní imunoreakci mezi fenobarbitalem a fenobarbitalem značeným fluoresceinem o omezený počet vazebných míst protilátky jsou produkty separovány podle velikosti v krátké kolonce a gelem a sleduje se jejich fluorescence. Reprodukovatelnost v sérii CV 7,32 – 9,48 %, mezi dny 5,38 – 10,05 %; vychýlení -8,27 až -4,97 %.
Chemiluminiscenční analýza v kompetitivním provedení používá např. ALP jako značku
a adamantyldioxetanfenylfosfát jako substrát.
Imunonefelometrická a imunoturbidimetrická analýza používá myší monoklonální protilátku proti fenobarbitalu
v přebytku, na kterou se naváže fenobarbital ze vzorku. Fenobarbital je navázán také na latexové částici a vytvoří
s neobsazenou protilátkou polymer, který precipituje. Při nefelometrií v kinetickém režimu byla reprodukovatelnost v sérii CV < 4,0 %, mezi dny < 4,2 %.

Plynová chromatografie může pro detekci používat hmotnostní detektor.
K dispozici je také stanovení HPLC na koloně C18 s acetonitrilem jako mobilní fází
v trimetylamoniumfosfátovém pufru. Reprodukovatelnost v sérii CV je < 5,6 %.

Toleranční rozpětí v EKK je 24 %.

Výsledky stanovení fenobarbitalu snižují: bilirubin (> 510 µmol/l), etanol, hemoglobin (> 10 g/l), karbamazepin, kyselina glutamová, pyridoxin, rifampin, aj.
Výsledky stanovení fenobarbitalu zvyšují: fenytoin, furosemid, kyselina valproová (10 -20 %), ostatní barbituráty (nejvíce secobarbital 93,3 %, butabarbital 67,3 %, aprobarbital 33,7 %, amobarbital 22,7 %, butalbital 14 %), salicyláty (10 -20 %), aj.