D-isoglukosamin, (2R,3S,4R,5R)-2-(aminomethyl)oxan-2,3,4,5-tetrol, 1-amino-1-deoxy-D-fruktosa.

Glykovaný sérový protein, GSP, glykovaný sérový albumin obsahují fruktosamin, ale ten tvoří jen jejich malou část. Dávat rovnítko mezi fruktosamin a glykované proteiny není z hlediska názvosloví správné.

Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (antikoagulans EDTA) nalačno. Výsledky v plazmě jsou o 10 % nižší než v séru. Intraindividuální variace 1,9 – 4,6 %. Stabilita v séru: 3 – 7 d při 15 – 25 °C, 14 d při 4 – 8 °C, 2 měsíce při -20 °C; v plazmě: 1 d při 4 °C. Stanovení lze provádět i v moči nebo tkáňovém homogenátu.

Fotometrie Nejběžnější metoda probíhá v alkalickém prostředí (uhličitanový pufr) a využívá redukčních schopností fruktosaminu. Enol (aldimin – Schiffova báze), který vzniká reakcí aldehydické skupiny glukózy a amino-skupiny bílkoviny, se přeměňuje Amadoriho přesmykem na fruktosamin. Ten redukuje nitrotetrazoliovou modř na formazan a sám se oxiduje na fruktosimin. Reakce probíhá při 37 °C 10 – 15 min a výsledný produkt se detekuje při 530 nm nebo 546/700 nm. Metoda je lineární do 1000 µmol/l (při vyšších koncentracích se ředí fyziologickým roztokem 10x). Mez detekce je 10 – 15 µmol/l. Preciznost v sérii 0,55 – 1,72 %, mezi sériemi je 0,55 – 1,78 %. Jako kalibrátor se doporučuje glykovaný poly-L-lysin (nebo dihydroxyaceton, nedoporučuje se dimorfolinfruktóza). Endogenní glukóza při reakci neruší, protože pH > 11. Urikáza slouží k odstranění interference kyseliny močové. Bilirubin ve vzorcích do 85 µmol/l, hemoglobin do 6 g/l, triacylglyceroly do 11,3 mmol/l a kyselina askorbová do 227 µmol/l neinterferují při testu. Silná hemolýza a ikterus (bilirubin > 684 µmol/l) ruší. Kyselina askorbová > 284 µmol/l způsobuje negativní interferenci.

ELISA na kompetitivním principu používá mikrotitrační destičky potažené monoklonální protilátkou vůči fruktosaminu. Při imunoreakci (60 min, 37 °C, třepání) soutěží fruktosamin ze vzorku nebo standardu s biotinylovaným fruktosaminem o vazebná místa protilátky. Nevázané frakce se vymyjí 3x a přidá se konjugát avidinu s křenovou peroxidázou. Po inkubaci (45 min, 37 °C) a vymytí 5x se přidá tetrametylbenzidin a reakce (15 – 30 min, 37 °C, ve tmě) se zastaví přidáním stop činidla (roztok H₂SO₄) a ihned se sleduje zbarvení při 450 nm. Signál v rozsahu 15,6 – 1000 µmol/l (osmibodová kalibrace) je nepřímo úměrný koncentraci fruktosaminu.

Poznámka: afinitní chromatografie slouží k rozdělení jednotlivých glykovaných proteinů, ale ne ke stanovení fruktosaminu.

Hodnoty snižuje: obezita, odvykání alkoholu, těhotenství (1. trimestr), vitamin C (nad 100 mg/l), pyridoxin, ceruloplasmin, cystein, superoxiddismutáza, tyreotoxicita; u některých postupů heparin a EDTA.

Hodnoty zvyšuje: akutní zánětlivý stav, selhávání ledvin, těhotenství (3. trimestr), hypotyreóza, hemodialýza, hemoglobin > 100 µmol/l, bilirubin > 100 µmol/l (někdy), triacylglyceroly > 7 mmol/l; léky: α-methyldopa, dobesilát.