Popis vyšetření: beta-KAROTEN

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

(3,7,12,16-tetramethyl-1,3,5,7,9,11,13,15,17-oktadekanonaen-1,18-diyl)bis[2,6,6-trimethylcyklohexen]; 1,3,3-trimethyl-2-[3,7,12,16-tetramethyl-18-(2,6,6-trimethylcyclohex-1-en-1-yl)oktadeka-1,3,5,7,9,11,13,15,17-nonaen-1-yl]cyklohex-1-en;

provitamin A, b-carotane, b-carotene, provitamin A1, carotene type I, carotene type II, trans-b-carotene, beta,beta-carotane, β,β-carotene.

Preanalytická fáze:

Odběr srážlivé krve nalačno. Vzorek chránit před světlem, vyloučit hemolýzu. Sérum separovat krátce po odběru. Sérum je ve tmě stabilní při 15 – 25 °C 2 – 3 d, při 4 °C 7 d, při -20 °C 30 d.

Poznámky k analytické metodě:

Fotometrie: Neeld-Pearsonova metoda spočívá v rozpuštění vzorku v etanolu a jeho extrakcido petroléteru. Po centrifugaci se petroléterová vrstva odsaje a měří se její absorbance při 450 nm proti petroléterovému blanku. Metoda je nepřesná, zdlouhavá a nespecifická.

HPLC: vzorek se rozpustí v etanolu a přidá se vnitřní standard (dimetyl-β-karoten) a kyselina askorbová. Po protřepání se přidá hexan, opět se protřepe a centrifuguje. Horní hexanová vrstva se odsaje. Hexan se odpaří v proudu dusíku na vodní lázni. Odparek se rozpustí v etanolu a nastříkne do chromatografu. Ke kalibraci se používají vzorky β-karotenu s koncentrací 0,372 až 1,116 µmol/l, ale metoda je lineární až do 3,72 µmol/l β-karotenu. Chromatografie se provádí na koloně C18 3,9 x 250 mm (velikost částic 10 µm) v izokratickém režimu s mobilní fází acetonitril-metylenchlorid 89:11 za tlaku 10 MPa s průtokem 2 ml/min. Detekce se provádí fotometricky při 450 nm. Chromatografie trvá 14 min. Mez detekce metody je 0,15 µmol/l. Preciznost v sérii je 4,8 %, mezi sériemi 5,2 %. Účinnost extrakce do hexanu byla 95 %.

Významné interference:

Snížené hodnoty: kouření, malabsorpce, malnutrice, vysoká teplota, chronický alkoholismus, snížený příjem β-karotenu.

Zvýšené hodnoty: diabetes mellitus, hypotyreóza, anorexie, těhotenství, zvýšený příjem β-karotenu (mrkev, špenát, rajčata, meruňky).

Léky: kanamycin, metformin, neomycin, perorální kontraceptiva.