TIBC (total iron-binding capacity)

Pro analýzu se používá sérum, případně heparinizovaná plazma. Výjimečně se stanovuje železo i v moči. Nelze použít chelatační antikoagulanty (citronan, EDTA, šťavelan). Stažení paže při odběru krve musí být co nejkratší. Optimální je ranní odběr nalačno, protože vlivem diurnální variace může dojít k poklesu železa během dne až
o 30 %. Vzorek by měl být odstředěn co nejdříve a to bez separačního gelu, jinak již po 2 h železo v séru začne stoupat.Stabilita železa v séru je při 20 – 25 °C 6 h – 7 dnů, při 4 – 8 °C 3 dny – 3 týdny a více než 6 měsíců při 20 °C (transferin je stabilní 1 měsíc). Hemolyzované vzorky obsahují železo z erytrocytů a výsledky jsou falešně zvýšené. Rovněž lipémie ruší stanovení. Výsledky jsou ovlivněny biorytmy, těhotenstvím, menstruačním cyklem a věkem.

Spektrofotometrie: Transferin se nasytí přebytkem železitých iontů. Zbývající volné železo se odstraní chelatačním činidlem, např. uhličitanem hořečnatým nebo oxidem hlinitým, které tvoří nerozpustný komplex
s volnými železitými ionty. Železo vázané na transferin se pak stanoví obvyklým fotometrickým postupem ke stanovení železa. Mez detekce metody je 1,79 µmol/l železa. Rozsah metody je 7,8 – 153,5 µmol/l. Preciznost
v sérii dosáhla CV 1,9 – 5,2, celkem 2,9 – 7,6 %.
Lze použít také iontově-výměnnou techniku, kdy se vzorek nanese na ionexovou pryskyřici, která byla nasycena železem. Po krátké době dojde k vytvoření rovnováhy a sérový transferin se nasytí železem, protože afinita železa k transferinu je vyšší než jeho afinita k pryskyřici. Takto nasycené sérum se pak analyzuje obvyklým fotometrickým postupem ke stanovení železa.
TIBC lze také stanovit doplňkovým měřením. Standard železa se inkubuje se sérovým vzorkem při pH 8,5 a tak se nasytí transferin. Zbývající volné železo se stanoví obvyklým fotometrickým postupem ke stanovení železa (bez uvolnění z transferinu). Tím se zjistí úbytek železa ze standardu a to je nenasycená vazebná kapacita transferinu. Tento výsledek se připočte k výsledku stanovení železa v sérovém vzorku a získá se údaj o TIBC. Nebo se reakční směs okyselí na pH 4,5 a z rozdílů měření při obou pH se stanoví TIBC. Posledně uvedená alternativa je plně automatizovaná metoda. Rozsah automatizované metody je 1,4 – 171,9 µmol/l železa. Analytická citlivost byla 1,4 µmol/l. Preciznost v sérii dosáhla CV 1,0 – 2,3 %, mezi dny 2,0 – 4,0 %. Interference biliribinu (1026 µmol/l), lipidů (9 mmol/l) a hemoglobinu (0,5 g/l) byly menší než 10 %. Postup je možné
i obrátit, tj. napřed měřit v kyselém prostředí a pak alkalizovat. Transferin pak dokáže vytrhnout železo
z komplexu s chromogenem a sleduje se pokles absorbance. Rozsah automatizované metody je 2,6 –
119,9 µmol/l železa.Preciznost v sérii dosáhla CV 0,7 – 2,6 %, celkem 1,4 – 3,3 %.

Stanovení TIBC se považuje za obsoletní a proto nemá k dispozici referenční materiál ani referenční metodu.

Toleranční limit EHK: se neuvádí

Koncentraci TIBC v séru a plazmě snižují: alkohol, hypoproteinémie, chloramfenikol, malnutrice, menstruace, záněty, aj.
Koncentraci TIBC v séru a plazmě zvyšují: Desferal, HELP (precipitace extrakorporálního heparinem indukovaného LDL), hemolýza, orální kontraceptiva, těhotenství, aj.