Netilmicinum, 1-N-ethylsisomicin, 1-N-ethylsisomycin,

Certomycin, Mensiso, Netilmicin, Netillin, Netilyn, Nétromicine, Netromycin, Netromycine,

(2R,3R,4R,5R)-2-[(1S,2S,3R,4S,6R)-4-amino-3-[[(2S,3R)-3-amino-6-(aminomethyl) -3,4-dihydro-2H-pyran-2-yl]oxy]-6-ethylamino-2-hydroxycyklohexyl]oxy-5-methyl-4-methylaminooxan-3,5-diol

Stanovení se provádí v plazmě (antikoagulans EDTA) nebo séru. Odběr se provádí před aplikací
a v definovaných intervalech po aplikaci (30 min po infúzi). Doporučuje se transport v chladu (4 °C) a separace krevních elementů do 2 h od odběru. Existuje riziko adsorpce na separační gely.
Stabilita vzorku (sérum, plazma) 18 – 26 °C: 1 – 2 h, 2 – 8 °C: 4 – 12 h, -20 °C: 4 – 8 týdnů. Biologický poločas 2,2 h.

Imunochemické postupy jsou nejběžnější. Používá se RIA, enzymová imunoanalýza a fluorescenční homogenní polarizační technika (FPIA) a fluorescenční substrát jako značka (SLFIA).

Radioimunoanalýza využívá vždy kompetitivní reakce mezi vzorkem značeným ¹²⁵I o vazebná místa na protilátce vůči netilmycinu. Reprodukovatelnost v sérii je CV 3,0 – 7,6 %, mezi sériemi 8,0 – 16,0 %; výtěžnost byla 90 %.
EMIT používá jako značku glukóza-6-fosfátdehydrogenázu a kompetitivní uspořádání imunochemické reakce. Aktivita nevázaného konjugátu je měřena jako vznikající NADH při 340 nm oxidací glukóza-6-fosfátu na
6-fosfoglukonát. Metodu lze provádět bez ředění do 8 mg/l. Reprodukovatelnost v sérii byla CV 6,3 – 7,7 %
a mezi dny 5,7 – 8,2 %.
Fluorescein jako marker se používá při homogenní fluorescenční polarizační imunoanalýze (FPIA)
v kompetitivním uspořádání. Běžně používaný automatizovatelný postup má citlivost 1 mg/l. Reprodukovatelnost v sérii je CV 1,6 – 4,6 %, mezi sériemi 9,7 %.
SLFIA používá jako konjugát β-galaktosylumbelliferon-netilmycin, který soutěží s netilmycinem ze vzorku
o protilátku. Po reakci nenavázaného konjugátu s β-galaktosidázou se sleduje výsledná fluorescence umbelliferonu. Reakce je lineární do koncentrace netilmycinu 12 mg/l. Reprodukovatelnost mezi dny byla CV 2,9 – 6,8 %, vychýlení -1,9 až +4,5 %; výtěžnost 98,5 -104,5 %.

K dispozici je také mikrobiologická analýza s Klebsiella pneumoniae a stanovení kapilární elektroforézou.

GLC postup vyžaduje poměrně náročnou přípravu: vysrážení, odpaření supernatantu, dvojstupňovou derivatizaci (N-trimetylsilylimidazol, N-heptafluorobutyrylimidazol), extrakci do hexanu a následné promytí extraktu vodou.
Při stanovení HPLC se vysráží bílkoviny acetonitrilem, netilmycin se extrahuje do metylenchloridu a provede se jeho dansylace. Fluoreskující derivát netilmycinu se extrahuje do octanu etylnatého a chromatografuje na reverzní fázi s acetonitrilem jako mobilní fází. Fluorimetrická detekce s excitací 220 nm a emisí 470 nm. Mez detekce je 0,5 mg/l, reprodukovatelnost v sérii CV 1,49 – 2,2 %.

Mezinárodní standard pro netilmycin (4810 IU) byl připraven v roce 1990.
Doporučená metoda dosud nebyla stanovena.

Výsledky stanovení netilmycinu zvyšuje gentamycin o 7 % (FPIA).