protilátky proti imunoglobulinům, anti-imunoglobuliny, RF

Stanovení se provádí v séru. Použití plazmy (antikoagulans heparin nebo EDTA) se nedoporučuje. Maximální čas od získání do zpracování vzorku je 1 h při laboratorní teplotě, 1 den při 4 °C.

Stabilita: 18 – 26 °C 1 den, 4 – 8 °C 3 – 7 dní, -20° C 1 – 3 měsíce.

Revmatoidní faktor se může také vyšetřovat v pleurální nebo synoviální tekutině.

ELISA IgG v mikrotitračních destičkách, které mají zakotvený purifikovaný králičí IgG antigen, aby se blokovaly nespecifické vazby během testu. V prvním kroku se váží protilátky RF (ředěné 100x) na králičí IgG v jamkách (inkubace 30 min za laboratorní teploty). Po vypláchnutí (4x) se přidá druhá králičí protilátka vůči RF IgG značená peroxidázou. Po inkubaci 30 min za laboratorní teploty opětném vypláchnutí (4x) se přidá peroxid vodíku a tetrametylbenzidin. Reakce se zastaví po 30 min okyselením, žluté zbarvení se detekuje do 30 min vertikální fotometrií při 450/630 nm. Absorbance vzorku ≥ kalibrátoru D je hodnocena jako pozitivní výsledek. Pro semikvantitativní hodnocení (kU/l) se provádí hodnocení na základě pětibodové kalibrační křivky 1 – 160 kU/l. Jiná souprava do 300 kU/l. Funkční citlivost je 2,6 kU/l RF IgG. Preciznost CV v sérii 5,6 – 13,3 %, mezi sériemi 9,3 – 11,6 %; linearita ředění je 91 – 114 %. Senzitivita je 44 % a specifita 91 % pro RF izotyp IgG. Stanovení neruší hemoglobin 2 g/l, bilirubin 342 µmol/l, triacylglyceroly 37 mmol/l.

ELISA IgM v mikrotitračních destičkách, které mají zakotvený purifikovaný králičí IgG antigen, aby se blokovaly nespecifické vazby během testu. V prvním kroku se váží protilátky RF (ředěné 100x) na králičí IgG v jamkách (inkubace 30 min za laboratorní teploty). Po vypláchnutí (4x) se přidá druhá kozí protilátka vůči RF IgM značená peroxidázou. Po inkubaci 30 min za laboratorní teploty opětném vypláchnutí (4x) se přidá peroxid vodíku a tetrametylbenzidin. Reakce se zastaví po 30 min okyselením, žluté zbarvení se detekuje do 30 min vertikální fotometrií při 450/630 nm. Absorbance vzorku ≥ kalibrátoru D je hodnocena jako pozitivní výsledek. Pro semikvantitativní hodnocení (kU/l) se provádí hodnocení na základě pětibodové kalibrační křivky 1 – 80 kU/l. Jiná souprava do 300 kU/l. Funkční citlivost je 1,2 kU/l RF IgM. Preciznost CV v sérii 1,7 – 10,4 %, mezi sériemi 7,6 – 10,6 %; linearita ředění je 97 – 117 %. Senzitivita je 66 % a specifita 82 % pro RF izotyp IgM. Stanovení neruší hemoglobin 2 g/l, bilirubin 342 µmol/l, triacylglyceroly 37 mmol/l.

ELISA IgA v mikrotitračních destičkách, které mají zakotvený purifikovaný králičí IgG antigen, aby se blokovaly nespecifické vazby během testu. V prvním kroku se váží protilátky RF (ředěné 100x) na králičí IgG v jamkách (inkubace 30 min za laboratorní teploty). Po vypláchnutí (4x) se přidá druhá kozí protilátka vůči RF IgA značená peroxidázou. Po inkubaci 30 min za laboratorní teploty opětném vypláchnutí (4x) se přidá peroxid vodíku a tetrametylbenzidin. Reakce se zastaví po 30 min okyselením, žluté zbarvení se detekuje do 30 min vertikální fotometrií při 450/630 nm. Absorbance vzorku ≥ kalibrátoru D je hodnocena jako pozitivní výsledek. Pro semikvantitativní hodnocení (kU/l) se provádí hodnocení na základě pětibodové kalibrační křivky 1 – 160 kU/l. Jiná souprava do 300 kU/l. Funkční citlivost je 3,3 kU/l RF IgA. Preciznost CV v sérii 3,5 – 6,0 %, mezi sériemi 7,9 – 14,7 %; linearita ředění je 88 – 120 %. Senzitivita je 51 % a specifita 88 % pro RF izotyp IgA. Stanovení neruší hemoglobin 2 g/l, bilirubin 342 µmol/l, triacylglyceroly 37 mmol/l.

Britský standard NIBSC 64/002 je považován za mezinárodní referenční materiál, WHO standard není k dispozici.

Výsledky stanovení revmatoidního faktoru jsou spontánně sníženy u 3 % populace; léky: penicilamin, preparáty zlata a síry, antimalarika, cytostatika.

Výsledky stanovení revmatoidního faktoru zvyšuje kouření (hodnoty jsou zvýšené ve stáří i u nekuřáků), perorální antikoncepce.