anti-gliadin antibodies, AGA, anti-gliadin (deamidated) antibodies, deamidated gliadin peptide antibodies

Stanovení se provádí v séru. Stabilita protilátek při 4 – 8 °C 10 dnů, při -20 °C 1 měsíc. Pro analýzu lze použít také plazmu (antikoagulans EDTA nebo heparin) nebo homogenizovanou tkáň. Bylo publikováno i vyšetření ve slinách, což je užitečné u pediatrických pacientů.

IgG protilátky jsou obvykle indikovány, pokud jsou IgA protilátky vůči gliadinu negativní.

RIA komerční soupravy nejsou dostupné.

ELISA se provádí v mikrotitračních destičkách se zakotveným pšeničním gliadinem. Kalibrátory nebo ředěné vzorky se pipetují do jamek, pak se roztoky 30 min inkubují. Obsah jamek se vyprázdní a jamky se promyjí třikrát pufrem TRIS. Přidá se protilátka vůči lidskému IgA nebo IgG značená křenovou peroxidázou, roztok se inkubuje 15 min a opět se obsah jamek vyklepne a třikrát promyje pufrem TRIS; přidá se substrát tetrametylbenzidin a následuje další inkubace 15 min. Další krok je přidání stop činidla (kyselina), inkubuje se 5 min a následuje měření při 450 nm (proti 600 – 690 nm), které nutno provést do 30 min. Stanovení se provádí za laboratorní teploty. Šestibodová kalibrace umožňuje měřit v rozsahu 0(?) – 100 kU/l. Mez detekce je 0,5 kU/l. Linearita ředění je 95 – 117 %. Preciznost v sérii 2,2 – 5,1 %, mezi sériemi 1,9 – 6,0 %. Stanovení neruší hemolýza, chylozita ani ikterus.

Chemiluminiscenční analýza se používá jen výjimečně. Postup je podobný jako ELISA, jen jako substrát se použije luminol. Přidá se p-jódfenol, H₂O₂ a roztok NaOH. Luminiscence se odečítá po 10 min při 430 nm. Preciznost v sérii 2,9 – 5,6 % pro IgA a 1,8 – 6,4 % pro IgG; mezi sériemi 7 % pro IgA a 3,0 % pro IgG.

Specifita stanovení je 90 %, senzitivita 100 %.

Interference dostupná literatura neuvádí.