methadon, methadon hydrochlorid, methadonum
4,4-difenyl-6-dimethylaminoheptan-3-on hydrochlorid

Adanon, Adanon hydrochloride, Adolan, Algidon, Algolysin, Algovetin, Althose hydrochloride, Amidon, Amidone, Biscuits, Butalgin, Depridol, Diaminon, Diaminon hydrochloride, Dolofin hydrochloride, Dollies, Dolohepton, Dolophin, Dolophin hydrochloride, Dolophine, Dolly, Eptadone, Fenadon, Fenadone, Heptadon, Heptadone, Heptanon, Ketalgin, Ketalgin hydrochloride, Mecodin, Medicine, Mephenon, Metasedin, Meth; Methadone HCL Intensol, Methadone M; Methadose, Methaquaione, Miadone, Moheptan, Phenadone, Phenadone hydrochloride, Physeptone, Polamidon, Polamidone, Racemic methadone, Racemic methadone hydrochloride, Symoron, Tussal, Tussol, Westadone

Stanovení v moči (případně v krvi, séru, slinách nebo vlasech). Vzorky je třeba skladovat v lednici při 2 – 8 °C po dobu 24 – 48 h; delší skladování vyžaduje -20 °C. Opakované zamrazování vzorků se nedoporučuje. Nepřidávat do vzorku moče azid sodný jako stabilizátor. Doba účinnosti 13 – 47 h. Biologický poločas 15 – 30 h. Průkaz
v moči 2 – 4 dny po aplikaci.
Je vhodné sledovat potenciální pokusy o ovlivnění výsledku (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích látek, či výraznou úpravu pH moče).

Imunochemické postupy jsou nejběžnější (RIA, EIA, FIA). Zejména jednoduché kvalitativní testy
s jednoúčelovými proužky nebo pro multidrogový screening. Test prokazuje přítomnost drogy, tj. metadonu
v moči. Konjugát (metadon-protein) imobilizovaný v membráně testovací destičky soutěží kompetitivně
s metadonem přítomným v testované moči o možnost navázaní se na omezené množství koloidním zlatem značených protilátek nanesených na začátek testovací membrány. Barevné monoklonální protilátky proti metadonu jsou spolu s močí posunovány po membráně. Pokud v moči metadon není, dostanou se nenavázané protilátky až k pásu konjugátů v oblasti označené písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh, což znamená negativní výsledek testu. Pokud je v moči metadon přítomný, navážou se na ně protilátky hned na počátku membrány a k pásu konjugátů se již jako volné nedostanou. V oblasti označené písmenem T proto žádný barevný pás nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu. Podmínkou vydání kvalitativního výsledku testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost barevného kontrolního pruhu v oblasti membrány označené písmenem C (Control region). Ten vytvoří reakce jiného systému antigen/protilátka přidávaného výrobcem do setu. Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl proveden správně a že je funkční, tj. že bylo na testovací destičku naneseno dostatečné množství moče a že se moč dobře nasákla do celé plochy testovací membrány. Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to skenování exponované destičky
a uložení vytvořeného obrázku v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití. Na cut-off hodnotě 300 µg/l je 96 % shoda výsledků kvalitativního imunochemického testu s GC-MS.
RIA analýza byla popsána i ve vlasech. Vychýlení výsledků do 450 µg/l bylo do 6 %. Reprodukovatelnost byla
v sérii CV 3,6 – 6,8 %, mezi sériemi 3,6 – 5,5 %. Detekční limit byl 0,5 µg/l a výtěžnost 80 – 89 %.
Homogenní imunoanalýza EMIT používá jako značku glukóza-6-fosfát dehydrogenázu, která pokud není
v imunokomplexu oxiduje glukóza-6-fosfát na glukonolakton-6-fosfát a současně redukuje NAD⁺ na NADH, což se sleduje při 340 nm. Metoda má reprodukovatelnost CV 6,3 – 11,8 %.
CEDIA je homogenní analýza, která využívá kompetice konjugátu metadonu s malým štěpem β-galaktozidázy
a metadonu ze vzorku o volná místa protilátky. Nespotřebovaný konjugát se opět spojí s komplementárním velkým štěpem β-galaktozidázy na aktivní enzym, který štěpí o-nitrofenyl-β-galaktopyranosid a hydrolýza se sleduje při 400 – 420 nm. Reprodukovatelnost je CV 3,9 – 7,7 %; výtěžnost je 89,0 – 93,1 %.
ELISA je založena na kompetitivní reakci mezi metadonem ze vzorku a metadonem značeným křenovou peroxidázou o vazebná místa protilátky, kterou jsou potaženy jamky mikrotitračních destiček. Po promytí se přidá tetrametylbenzidin a výsledné zbarvení se po zastavení reakce sleduje při 450 nm vertikální fotometrií. Reprodukovatelnost v sérii CV 2,36 – 6,6 %.
Homogenní fluorescenční FPIA stanovení lze provádět v koncentračním rozsahu 50 – 900 µg/l s repro-dukovatelností CV < 7 %.
Chemiluminiscenční multidrogový biočip umožňuje vyhodnocovat na analyzátoru metadon v krvi s repro-dukovatelností v sérii CV 6,6 – 8,2 % a citlivostí 0,6 µg/l; ve slinách s reprodukovatelností v sérii CV 7,1 – 8,7 %, mezi sériemi 10,3 – 12,3 %.
Při homogenní metodě KIMS (kinetická interakce mikročástic v roztoku) je metadon vázán přes spojovací bílkovinu na karboxylované polystyrénové částice a polyklonální kozí protilátka volně v roztoku. Po kompetitivní imunoreakci mezi metadonem ze vzorku a konjugátem metadonu se sleduje zákal imunokomplexu. Cut-off semikvantitativního testu je 300 µg/l. Reprodukovatelnost pro cut-off v sérii CV je 1,1 – 2,7 %, mezi dny 3,2 –
4,4 %. Kvantitativní test má limit detekce 19 µg/l, reprodukovatelnost v sérii CV je 0,8 – 3,2 %, mezi dny 1,5 –
4,2 %.
Test není vhodný pro soudně lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen vhodnou kvantitativní a specifickou metodou založenou například na principu GC/MS nebo HPLC.

Kvalitativní TLC začíná adsorpcí metadonu na pryskyřici Amberlite XAD-2, z které je eluován do směsi etylacetát-izopropylalkohol 85:15. Eluát je pak rozdělen na silikagelu ve směsi etylacetát-izopropylalkohol-hydroxid amonný 85:10:5.
GC-MS postup začíná extrakcí metadonu ze vzorku do vodného metanolu s přídavkem vnitřního standardu
(D₃-2-etyliden-1,5-dimetyl-3,3-difenylpyrrolidin). Odparek se rozpustí v etylacetátu a nastříkne na kapilární kolonu. Teplota stoupá od 70 do 280 °C. Sledují se ionty metadonu 223 a 294. Reprodukovatelnost v sérii CV je 11 – 14 %, mezi sériemi 11 – 15 %, vychýlení -11 až +9 %.
Na HPLC koloně je používán jako komplementární ion fluoreskující 9,10-dimetoxyantracen-2-sulfonová kyselina. Rozdělená mobilní fáze je následně extrahována do chloroformu a analyzována fluorimetrem (excitace 380 nm, emise 445 nm). Detekční limit je 25 µg/l, vychýlení -5,2 až +6,2 %, reprodukovatelnost má CV 3,9 – 7,7 %.

Výsledky stanovení metadonu v moči snižují: tekutá mýdla.
Výsledky stanovení metadonu v moči zvyšují: α-acetylmetadol, benzodiazepiny (Flunitrazepam, Rohypnol, Valium), clomipramin, cyamemazin, difenhydramin, doxylamin, etanol, chlorpromazin, kodein, Laam, levomepromazin, levorfanol, n-metyldietanolamin, Pentazocaine, promethizin, tetrahydrozolin, thioridazin, verapamil, aj.