|
Popis vyšetření: Protilátky vůči LISTERIA MONOCYTOGENES
Zařezeno v kategoriích: Synonyma:
Listeria monocytogenes antibodies (Listeriosis, Listeriasis, Listerellosis, Listerella) Preanalytická fáze:
Odebírá se venózní srážlivá krev ráno nalačno. Následný odběr je po 4 týdnech. Sérum je stabilní při laboratorní teplotě 2 d, při 4 – 8 °C 7 d, při -20 °C 1 rok. Poznámky k analytické metodě:
Latexová aglutinace Polyvalentní antigeny jsou připravené z purifikovaných bičíkových proteinů Listeria monocytogenes (antigeny A, B a C) a Listeria grayi (antigen E). Latexové částice jsou potažené králičím antisérem na kterém jsou navázány uvedené antigeny. Po smíchání se sérem obsahujícím protilátky vůči antigenům Listeria dochází k rychlé viditelné aglutinaci ve formě chomáčků. ELISA Mikrotitrační destička s jamkami potaženými antigenem (listeriolyzin O) je po přidání séra inkubována 60 min při 37 °C (dochází k navázání specifických protilátek vůči Listeria monocytogenes). Přebytek protilátek je odstraněn promytím (5x) a přidá se králičí protilátka vůči ovčímu IgG konjugovaná s křenovou peroxidázou. Po další inkubaci (60 min při 37 °C) a promytí (5x) se přidá chromogen kyselina 2,2´-azino-bis(3-etylbenztiazolin-6-sulfonová (ABTS) a vzniklé zbarvení se měří po 30 min vertikální fotometrii při 405 nm. Pozitivita se určuje srovnáním s negativním a pozitivním kontrolním vzorkem. Významné interference:
Falešná pozitivita může být způsobena Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus a Streptococcus pyogenes. |