krevní typ, blood group, blood type

K vyšetření se používá jak srážlivá, tak nesrážlivá krev. Jako antikoagulační činidlo jsou nejvhodnější draselné soli kyseliny etylendiamintetraoctové (EDTA). U nesrážlivé krve je nutné vyvarovat se odběrovým zkumavkám se separačním gelem. Vzorek se centrifuguje 10 min při 1800 až 2500 g, nejlépe dle doporučení výrobce odběrového systému.

Materiál je stabilní 12 h při 18 – 25 °C, 7 d při 2 – 8°C. Oddělenou plazmu nebo sérum je možné skladovat 6 měsíců při teplotě ≤ -20°C

Jedná se o imunoaglutinační metodu založenou na reakci antigen-protilátka; jako značka (nosič) slouží erytrocyty. U AB0 krevního systému se musí provádět jak vyšetření aglutinogenů, tak vyšetření aglutininů. Výjimku tvoří děti do 6 měsíců, u kterých ještě nemusí být vyvinuty přirozené protilátky vůči AB0 znakům a tudíž se provádí jenom vyšetření aglutinogenů dvěma sadami vyšetřovacích sér (různé klony). Při vyšetření aglutinogenů se zjiš
eují znaky na vyšetřovaných erytrocytech. K vyšetření se v současnosti používají komerčně vyráběné séra, která obsahují monoklonální protilátky třídy IgM a tudíž reakce je možno provádět v solném prostření (fyziologický roztok). K dispozici jsou séra anti-A, anti-B, anti-AB. V případě orientačního nebo kontrolního vyšetření je možné použit jenom séra  anti-A a anti-B. Sérum anti-AB je jenom potvrzující. Při provádění vyšetření je nutné použit negativní kontrolu, která slouží pro zachycení falešně pozitivních reakcí. Jako negativní kontrolu je možné použít fyziologický roztok (hlavně při použití skleněných zkumavek jako kontroly čistoty skla), ale nejvhodnější je kontrolní sérum dodané výrobcem. Kontrolní sérum má stejné složení jako ostatní diagnostická séra, ale neobsahuje žádnou protilátku. Samotné provedení testů, může být plně manuální, poloautomatické, nebo automatizované. Vyšetření mohou být prováděná na podložním skle (pouze orientační vyšetření), na mikrotitračních destičkách, ve zkumavkách, nebo metodou sloupcové aglutinace. Výhodou vyšetření na mikrotitračních destičkách je možnost zpracování většího počtu vzorků. Komerčně jsou dodávané mikrotitrační destičky s už připravenými séry. Metoda může být plně automatizovaná. Odečet reakcí může být vizuálně nebo spektrofotometricky. U vyšetření sloupcovou aglutinací se využívá speciální mikrozkumavka s vrstvou dextran-akrylamidového gelu nebo skleněných mikročástic, kterou musí erytrocyty překonat při centrifugaci. Vrstvou projdou jenom neaglutinované erytrocyty. U tohoto vyšetření může být protilátka už obsažená v mikrozkumavce. Metoda sloupcové aglutinace může být také plně automatizovaná; odečet reakce je na základě analýzy obrazu. Při vyšetření aglutininů používáme 0,8 – 5 % (dle způsobu provedení) suspenzi erytrocytů aspoň 1x propranou ve fyziologickém roztoku. Výjimkou je pupečníková krev novorozence, kterou je nutné promýt alespoň 3x. Při orientačním vyšetření na podložním sklíčku je možné použit přímo plné krve bez centrifugace. Kapku krve a diagnostického séra přeneseme na podložní sklíčko, důkladně promícháme a krouživým pohybem podložního sklíčka podporujeme aglutinaci. Aglutinace svědčí pro přítomnost daného antigenu. Na podobném principu jsou založené bed-side (POCT) testy. V případě vyšetření na mikrotitrační desce je aglutinace podporována centrifugací a třepáním na třepačce, nebo použitím samotné třepačky. U vyšetření ve zkumavce se aglutinace podporuje rovněž centrifugací. Vyšetření se běžně provádějí při laboratorní teplotě, ale při jakékoli nesrovnalostí, nebo nejasné reakci je nutná inkubace 5 – 10 min při 37°C, kterou dosáhneme zesílení reakce, nebo rozpadu aglutinátu při falešné pozitivitě způsobené přítomností chladových protilátek. Při hodnocení se semikvantitativně posuzuje sila reakce: 0 resp. negativní a pozitivní 1+ až 4+.

 U vyšetření aglutininů se zjiš
euje přítomnost odpovídajících protilátek AB0 systému, a tudíž se používá sérum (nebo plazma) a diagnostické erytrocyty, které jsou komerčně dodávané v pravidelných intervalech (obvykle 4 – 6 týdnů). K vyšetření se používají diagnostické erytrocyty skupiny A1, B a krevní skupina 0 jako negativní kontrola, popřípadě k odhalení vzácných anti-H protilátek. Techniky vyšetření jsou stejné jako u stanovení aglutinogenů.

 Výsledek krevní skupiny je vyhodnocení obou vyšetření, tj. jak aglutinogenů, tak aglutininů. 

přítomnost chladových protilátek, přítomnost nespecifických protilátek na kteroukoli složku diagnostických roztoků, hemolýza vzorku, přítomnost patologických (monoklonálních) imunoglobulinů.