Popis vyšetření: CYKLOSPORIN

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

cyklosporin A, ciclosporin;
Sandimmune, Neoral, Gengraf, Consupren;
CSA, CYPA, CyA

Mezinárodní zkratka neexistuje, ale běžně se používají: CSA (Google 337 000), CYPA (Google 156 000), CyA (Google 60 600)

Preanalytická fáze:

Odběr 12 – 18 h po orálním podání, 12 h po intravenózním podání nebo bezprostředně před další dávkou.
V ČR doporučeno stanovení v plné, nesrážlivé krvi (antikoagulans EDTA). Nemrazit, neměřit v krevním séru.
V literatuře uvedeno také stanovení v plazmě (antikoagulans EDTA) nebo séru.
Stabilita vzorku (sérum, plazma) 20 – 25 °C: 13 dní, 4 – 8 °C: 7 dní, vzorek nemrazit!

Poznámky k analytické metodě:

Prvním komerčně dostupným postupem byla RIA metoda v kompetitivním uspořádání (vychýlení 23 – 40 %). Monoklonální protilátka byla značena buď 3H (při absorpci na aktivní uhlí je velká variabilita výsledků) nebo 125I (křížová reaktivita s některými metabolity).
Nyní se používá enzymová imunoanalýza EMIT s glukóza-6-fosfátdehydrogenázou jako markerem (vychýlení +3 až +9 %, výtěžnost 100 – 115 %, reprodukovatelnost v sérii 4,1 – 8,1 %, mezi sériemi 4,9 – 10,9 %)
a fluorescenční homogenní polarizační technika FPIA, kdy je protilátka značená fluoresceinem (vychýlení 12 –
31 %, reprodukovatelnost v sérii 6,1 – 7,0 %, mezi sériemi 4,4 – 4,6 %). Mezi doporučeními z konference v Lake Louise v roce 1995 byla uvedena kritéria, které musí splňovat metoda, aby mohla být použita pro TDM
u pacientů léčených cyklosporinem. Pro reprodukovatelnost: < 10 % při koncentraci 50 mg/l a < 5 % při koncentraci 300 mg/l. Obecně mohou být výsledky imunochemickými metodami ve srovnání s HPLC vyšší (např. FPIA o 20 – 174 %) vlivem křížových reakcí metabolitů cyklosporinu. Imunochemické postupy jsou nejběžnější.
Rovněž je používáno stanovení reverzní HPLC (extrakce do éteru) s fotometrickou detekcí při 210 – 214 nm nebo hmotnostním detektorem. Jako vnitřní standard se používá cyklosporin D, mobilní fází je buď voda-metanol nebo metanol-acetonitril. Použití plastových zkumavek vede ke vzniku falešných píků vedle cyklosporinů A i D. Mez stanovitelnosti pro imunometody i HPLC je 25 µg/l.

Významné interference:

Výsledky stanovení cyklosporinu snižuje: fenobarbital, fenytoin, karbamazepin, kyselina valproová, pšeničný škrob (prášek v rukavicích), rifampin, sulfadimidin (i.v.) trimethoprim (i.v.) aj.
Výsledky stanovení cyklosporinu zvyšují: androgeny, dilthiazem, erytromycin, etanol, flukonazol, grepový džus, itrakonazol, ketokonazol, nikardipin, verapamil, vorikonazol aj.