FONS Příručka laboratorních vyštření

Popis vyšetření: PROTEIN C

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

PC, vitamin K-dependentní protein C, aktivovaný protein C= EC 3.4.21.69 , APC, antikoagulační protein C, autoprothrombin IIA, koagulační faktor XIV

Preanalytická fáze:

Vyšetření se provádí z citrátové plazmy chudé na destičky, která se získá odběrem žilní krve do zkumavky s citrátem sodným v poměru 1 díl citrátu + 9 dílů krve. Koncentrace citrátu se doporučuje v rozmezí 0,105 až 0,109 mol/l. Při venepunkci je doporučeno používat jehlu o průměru 0,7 až 1,0 mm (tenčí jehly mohou způsobit hemolýzu a předčasnou aktivaci destiček a koagulačních faktorů) a je nutné vyvarovat se použití škrtidla déle než 1 min. Doprava materiálu do laboratoře do 2 h. Stabilita plazmy je dle doporučení ČHS 4 h při 15 – 25 °C. Při léčbě heparinem se doporučuje oddělit plazmu do 30 min; vzorek se centrifuguje 10 min při 1800 až 2500 g, nejlépe dle doporučení výrobce odběrového systému.

V případě zmrazení plazmy lze skladovat 4 týdny při -20 °C nebo 6 měsíců při -70°C . Pro následné zpracování zmrazené plazmy je nutno plazmu rozmrazovat po dobu cca 5 min ve vodní lázni cca 37 °C, šetrně promíchat a ihned provést měření. Rozmražené vzorky plazmy nelze opakovaně zamrazovat.

Poznámky k analytické metodě:

Protein C je vitamin K dependentní glykoprotein, přítomný v plazmě jako proenzym. Jeho proměna na aktivní formu probíhá na endotelu pomocí trombin-trombomodulinového komplexu. Aktivovaný protein C, za účasti kofaktoru (protein S), štěpí FVa a FVIIIa. To vede k potlačení koagulačního procesu.

Protein C může být měřen pomocí:
Imunologických testů (ELISA, EIA, RIA) – měří se pouze množství proteinu C (antigen) a nikoliv jeho funkční aktivita. Používají se jak monoklonální, tak polyklonální protilátky.
Chromogenní test – k ředěné vyšetřované plazmě se přidá specifický aktivátor proteinu C (extrakt z jedu hada Akistrodon contortrix contortrix). Po inkubaci je ke směsi přidán specifický chromogenní substrát, který je štěpen aktivovaným proteinem C za uvolnění žlutě zbarveného chromoforu. Intenzita zbarvení je přímo úměrná aktivitě proteinu C ve vzorku. Tento test je nejvíc rozšířen. Dynamický měřící rozsah je 5-140 %, mez detekce 5 %, precíznost v rámci série je 0,37 - 1,17 %, mezi sériemi je 1,26 - 1,97%.

Test na bázi aPTT – k vzorku plazmy se přidá aktivátor proteinu C; následně se provede aPTT test, a prodloužení testu je závislé na koncentraci proteinu C ve vzorku. Test je možné provést i na bází PT. Pro standardizaci se vzorek ředí protein C deficitní plazmou. Tento typ testu je citlivější k mutacím vedoucím k poklesu katalytické aktivity proteinu C.

Biologický poločas: aktivovaná forma má poločas 20 – 30 min, neaktivní protein C má poločas 5 – 6 h.

Významné interference:

Hodnoty snižuje: heparin, warfarin, obezita, akutní trombotické stavy, hormonální antikoncepce, L-asparagináza, stavy po operacích, fyziologicky u novorozenců.

Hodnoty zvyšuje: věk, stanazol, drotrecogin α, těhotenství.

Data jsou chráněna autorským zákonem.