TBG, thyroxin vázající globulin; thyroxine binding globulin, T₄-binding globulin.

Stanovení se provádí ve venosní srážlivé krvi odebrané nalačno. Sérum je stabilní při 15 – 25 °C 8 h, při 4 – 8 °C 2 – 30 dnů, při -20 °C > 1 měsíc. Plná krev je stabilní 3 d.

Přepočet: mg/l x 18,5 = nmol/l.

RIA začíná pipetováním vzorku do zkumavek potažených polyklonálními kozími protilátkami vůči myšímu IgG, na které se navazují myší monoklonální protilátky vůči TBG a na TBG ze vzorku pak myší monoklonální protilátky vůči TBG značené ¹²⁵I. Po inkubaci 2 h za laboratorní teploty a třepání se zkumavky dekantují a propláchnou. Po promytí se vázaná aktivita ¹²⁵I se měří na gama-počítači 1 min. Koncentrace TBG v kalibrátorech a vzorcích je nepřímo úměrná změřené radioaktivitě. Kalibrační křivka se sestrojí na základě stanovení pěti sérových kalibrátorů a hodnoty TBG přítomného ve vzorcích se odečtou z této křivky. Rozsah měření 4 – 80 mg/l. Analytická senzitivita 4 mg/l, funkční senzitivita < 5 mg/l. Preciznost v sérii je 2,2 – 4,1 %, mezi sériemi 3,4 – 4,9 %. Hemoglobin 9,6 g/l, bilirubin 342 µmol/l a triacylglyceroly 6,7 mmol/l stanovení neruší. Zkumavky nemusí být potažené a kompetice může probíhat volně v roztoku. Vzniklý imunokomplex se pak vysráží polyetylénglykolem. Měření se provádí v precipitátu po centrifugaci a dekantaci.

IRMA je sendvičový postup. Protilátky vůči TBG jsou navázané na skleněných částicích a jsou přidány v přebytku k séru a diluentu. Pak se přidá protilátka vůči TBG značená ¹²⁵I. Po krátké inkubaci (15 min při 18 – 25 °C) a centrifugaci se supernatant odsaje. Navázaná aktivita se změří gama-počítačem (1 min). Na základě kalibrace se měří signál, který je přímo úměrný koncentraci TBG.

ELISA používá jamky mikrotitračních destiček potažené streptavidinem na které se naváže biotinylovaná polyklonální protilátka vůči TBG. O její vazebná místa soutěží TBG ze vzorku a TBG značený křenovou peroxidázou po dobu 30 min za laboratorní teploty. Po promytí (3x) přidáme substrát tetrametylbenzidin s H₂O₂ a inkubujeme 15 min; přidáme stop činidlo (1 M HCl) a měří se při 450/620-630 nm do 30 min, kdy absorbance je nepřímo úměrná koncentraci TBG. Je-li absorbance příliš vysoká, lze použít filtr 405 nebo 415 nm. Celý postup se realizuje za laboratorní teploty. Šestibodová kalibrace umožňuje měření v intervalu 1 – 64 mg/l. Mez detekce je 1 mg/l. Preciznost v sérii je 3,6 – 8,2 %, mezi sériemi 4,8 – 9,0 %. Silná hemolýza a lipémie ruší analýzu. Reagencie nutno skladovat při 2 – 8 °C. Efekt nadbytku antigenu se neprojevuje do 3400 mg/l TBG.

Další postup používá králičí protilátku vůči TBG a o její vazebná místa soutěží TBG ze vzorku a TBG značený β-D-galaktosidázou. Po inkubaci 2 h při 15 – 22 °C se imunokomplex vysráží kozím antisérem proti králičímu globulinu během 30 min. Po promytí fosfátovým pufrem a centrifugaci se precipitát ještě jednou promyje a aktivita β-D-galaktosidázy se měří po reakci s o-nitrofenyl-β-D-galaktopyranosidem (inkubace s příměsí metanolu 2 h při 37 °C). Reakce je zastavena uhličitanem sodným a absorbance měřená při 405 nm je nepřímo úměrná množství TBG. Rozsah měření 3,3 – 52 mg/l TBG. Preciznost v sérii 6,3 – 9,5 %, preciznost mezi sériemi 4,9 – 7,9 %; zpětný výtěžek 74 – 130 %.

DELFIA produkt byl stažen z trhu.

CLIA stanovení je založeno na kompetitivní imunochemické reakci se sledováním luminiscence zesílené enzymem. TBG ze vzorku v prostředí pufrovaného roztoku soutěží s lidským TBG konjugovaným s alkalickou fosfatázou o vazebná místa na myší monoklonální protilátce vůči TBG imobilizované na polystyrénové kuličce. Reakce probíhá 30 min při 37 °C. Po odstranění nezreagovaného materiálu odstředěním a promytí se přidá substrát adamantyldioxetanfenylfosfát, který hydrolyzuje stykem s alkalickou fosfatázou za vzniku nestabilního meziproduktu. Ten se rozpadá za vzniku záření, které se detekuje luminometrem. Intenzita záření 425 – 500 nm je nepřímo úměrná koncentraci TBG ve vyšetřovaném vzorku. Výsledky jsou stanoveny podle kalibrační křivky, která je pro přístroj specifická a je určena na základě dvoubodové kalibrace (v kvadrupletu) a vzorové křivky získané z čárového kódu činidla. Rozsah kalibrace je do 80 mg/l. Analytická citlivost je 1,6 mg/l, funkční citlivost 3,5 mg/l. Preciznost v sérii 6,1 – 16,2 %, celkem 7,5 – 21,2 %; linearita ředění 84 – 107 %, zpětný výtěžek 87 – 108 %. Při měření mohou interferovat heterofilní protilátky. Ani vysoké koncentrace hemoglobinu (3,84 g/l), bilirubinu (342 µmol/l) a triacylglycerolů (33,9 mmol/l) neruší. Zvýšené hladiny se mohou projevit při léčbě estrogeny.

Toleranční limit EHK:17 %. 

Hodnoty snižují: hemodialýza, plazmaferéza, stresové stavy; léky: androgeny, anabolické steroidy, L-asparagináza, dehydroepiandrosteron, kolestipol, dlouhodobá léčba kortikoidy.

Hodnoty zvyšují: těhotenství (v 2. trimestru na dvojnásobek), tělesná zátěž, menopauza, hemolýza, heroin; léky: estrogeny, erytropoetin, 5-fluorouracil, klofibrát, metadon, mitotan, perfenazin, tamoxifen.