1,3,7-trimethylxanthin, Coffee Break, Dexitac, Durvitan, Magnum, Max Alert, Magnum, Mole, No-Doz, Pep Back, Percoffedrinol N, Percutafeine, Pick-me-up, Pro-Plus, Stay Awake, Vivarin

3,7-dihydro-1,3,7-trimethyl-1H-purin-2,6-dion

Stanovení se provádí v séru, plazmě nebo moči, případně ve slinách.
Vzorky skladovat v lednici; uváděná stabilita při 2 – 8 °C je 1 týden, při zamrazení déle (nespecifikováno). Transport v chladu, centrifugovat v chlazené centrifuze.

Imunochemické postupy používají nejvíce postup EMIT s peroxidázovým markerem. Obvyklé je kompetitivní uspořádání. Celková reprodukovatelnost je považována za vyhovující, pokud CV < 10 %.

Plynová chromatografie používá jako vnitřní standard 7-β-hydroxyetylteofylin a vysušený vzorek se extrahuje do absolutního etanolu. Chromatografie se provádí při 120 °C. Mez stanovitelnosti kofeinu byla 15 mg/l a metoda byla lineární až do 1000 mg/l. Reprodukovatelnost dosáhla CV 2,0 % a vychýlení ±2,1 %.
HPLC pro stanovení v moči používá mobilní fáze metanol-voda-kyselina octová 20:75:5 a fotometrické detekce při 273 nm. V moči se stanovují koncentrace 3,21 až 71,2 mg/l. Reprodukovatelnost v sérii dosáhla CV 0,44 %. Lze připojit i tandemovou MS s elektrosprejovou ionizací a v kvadrupólové iontové pasti. V uvedeném případě je celková reprodukovatelnost 7 – 10 %, vychýlení -11 až + 24 % a výtěžnost 81 – 92 %.

Kapilární zónová elektroforéza s fotometrickou detekcí při 200 nm a micelární elektrokinetická kapilární chromatografie (glycinový pufr s laurylsíranem sodným, pH 10,5) byly rovněž použity ke stanovení kofeinu ve vzorcích séra a moče s fotometrickou detekcí při 220 nm). V druhém případě byly dosaženy lepší výsledky a to: mez detekce 0,4 mg/l, mez stanovitelnosti 0,5 mg/l, reprodukovatelnost v sérii CV sérum 6,95 %, moč 0,68 %, mezi dny sérum 4,07 %, moč 3,35 %.

Výsledky stanovení kofeinu v séru snižují: bilirubin (>1020 µmol/l), hemoglobin (> 10 g/l), kouření, aj.
Výsledky stanovení kofeinu v séru zvyšují: ciprofloxacin, čaj, enoxacin, flukonazol, lipémie (Intralipid > 7,5 g/l), káva, norfloxacin, pipemidová kyselina, aj.