Clostridium tetani IgG antibodies, anti-Clostridium tetani toxin IgG, tetanus toxoid IgG antibodies

Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (antikoagulans citrát). Stabilita v séru nebo plazmě při 2 – 8 °C je 5d, při -20 °C déle. Opakované rozmrazování se nedoporučuje.

ELISA používá protilátky, které jsou potažené toxinem IgG Clostridia tetani. Do jamek se pipetuje standard nebo vzorek a inkubuje se 1 h při 37 °C. Po promytí (3-5x) se přidá konjugát toxinu IgG Clostridia tetani s křenovou peroxidázou a inkubuje se 30 min za laboratorní teploty bez přístupu přímého slunečního světla. Po promytí (3-5x) se při dá tetrametylbenzidin a nechá se proběhnout barevná reakce 15 min ve tmě při laboratorní teplotě. Přidá se stop činidlo (např. 0,2 M H₂SO₄) a absorbance se měří do 30 min bichromaticky při 450/620 nm.  Rozsah měření na základě čtyřbodové kalibrace je v rozsahu 0 – 1 kU/l. Vyšší koncentrace protilátek mohou způsobit vznik sraženiny a tyto vzorky vyžadují další ředění (obvykle 1+1). Preciznost v sérii je 4,9 – 7,1 %, mezi sériemi 7,7 – 11,3 %. Citlivost metody je 0,05 kU/l, specifita > 95 %. Stanovení neruší hemoglobin 10 g/l, triacylglyceroly 5,65 mmol/l, bilirubin 372 µmol/l.

V dostupné literatuře nejsou uvedené.