Popis vyšetření: KYSELINA VALPROOVÁ

Zařezeno v kategoriích:

Synonyma:

Byk, Convulex, Convulexette, Depacon, Depakene, Depakin, Depakote, Depakote XR, Depamide, Deparkine, dipropyloctová kyselina, Divalproex Sodium, Epilim, Epival, Ergenyl, Gerot, Leptilan, Leptilen, Logical, Mylproin, Orfilept, Orfiril, Promonta, 2-propylvalerová kyselina, Propymal, Valkote, Vistora

2-propylpentanová kyselina

Preanalytická fáze:

Stanovení se provádí v séru, případně v plazmě (koagulant EDTA), moči nebo mateřském mléku.
Stabilita vzorku: 20 – 25 °C: 2 dny; 4 – 8 °C: 7 dnů; -20 °C: 12 týdnů.

Poznámky k analytické metodě:

Kompetitivní EMIT využívá soutěže kyseliny valproové ze vzorku a konjugátu kyseliny valproové s glukóza-
6-fosfátdehydrogenázou a vazebná místa na protilátce. Enzymová značka je v imunokomplexu inhibována. Čím více léčiva je ve vzorky, tím méně konjugátu se naváže a měřená aktivita enzymu bude vyšší. Pracovní rozsah metody je 10 – 150 mg/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 5,9 – 10,8 %.
CEDIA používá jako první činidlo monoklonální protilátku, glukóza-6-fosfát a NAD+ a jako druhé činidlo konjugát kyseliny valproové s glukóza-6-fosfátdehydrogenázou v TRIS pufru.
FPIA využívá kompetice mezi léčivem ze vzorku a léčivem označeným derivátem fluoresceinu o vazebná místa na protilátce. V imunokomplexu má fluorescein omezenou pohyblivost a vyšší emisi polarizovaného světla. Množství konjugátu v imunokomplexu je tím nižší, čím je více léčiva ve vzorku, tedy měřený signál je nepřímo úměrný koncentraci kyseliny valproové ve vzorku. Reprodukovatelnost v sérii CV < 2,6 %, mezi sériemi < 5,2 %; výtěžnost > 97 %.

Latexová aglutinace s antigenem vázaným na latex a volnou protilátkou. Imunokomplex se stanovuje turbidimetricky nebo nefelometricky. Reprodukovatelnost v sérii CV 0,97 – 4,32 %.

Plynová chromatografie v koncentračním rozsahu 2 – 180 mg/l měla reprodukovatelnost v sérii CV 4,3 – 5,8 %.
HPLC začíná extrakcí do dichlormetanu. Jako mobilní fáze se používá buď hexan-chloroform (94:6) nebo acetonitril-metanol-fosfátový pufr (6:1:3) a vnitřní standard je buď kyselina kapronová nebo kaprylová. Detekce se provádí při 254 nm. Při použití MS detektoru s elektrosprejovou ionizací v intervalu 0,5 – 60 µg/l byl
CV < 10 % a výtěžnost 92,9 – 98,3 %.

Izotopová diluce s GC-MS je navržena jako referenční metoda. Jako vnitřní standard je použita 2-propyl-
[3,3,3-d3]valerová[5,5,5-d3] kyselina. Měření se provádí elektronovou nebo chemickou ionizací
a monitorováním vybraného iontu ve fragmentometrickém módu. Tímto způsobem lze dosáhnout detekční limit 10 µg/l a CV < 1,5 %.

Většina prací uvádí dobrou korelaci mezi EMIT, FPIA, GLC a HPLC.

Standardní referenční materiál NIST pro kyselinu valproovou nese označení: SRM 1599 Anticonvulsant Drug Level Assay Standard - Carbamazepine, valproic acid. Je deklarován pro tři koncentrace stanovované plynovou nebo kapalinovou chromatografií.

Toleranční limit EHK: 24 %.

Významné interference:

Výsledky stanovení kyseliny valproové snižuje extrémně vysoký bilirubin (> 1020 µmol/l).
Výsledky stanovení kyseliny valproové zvyšují: cimetidin, dikumarol, fenylbutazon, 3-ketovalerová kyselina, ranitidin, salicyláty, aj.