Systematické názvy:

7,8-didehydro-4,5-α-epoxy-17-methylmorphinan-3,6-α-diol,

7,8-didehydro-4,5-epoxy-17-methyl-(5α,6α)-morphinan-3,6-diol,

(5R,6S,9R,13S,14R)-4,5-epoxy-N-methyl-7-morphinen-3,6-diol,

4,5-α-epoxy-17-methyl-7-morphinen-3,6-α-diol,

7,8-didehydro-4,5-epoxy-17-methyl-morphinan-3,6-diol,

4a,5,7a,8-tetrahydro-12-methyl-9H-9,9c-iminoethanophenanthro(4,5-bcd)furan-3,5-diol

Další názvy:

Aquettant, Astramorph, DedoDur, Dimorf, Dinamorf, Dolcontin, Dulcontin, Duramorph, Epimorph, M-Eslon, Morfina, Morphin, Moscontin, MS Contin, Nepenthe, Oramorph SR, Sevredol, Statex SR

Při průkazu morfinu v moči je třeba zabránit manipulaci se vzorkem. Také kvantitativní analýzy se provádějí zpravidla v moči.

Citronan a oxalát snižují naměřené hodnoty morfinu.

Imunochemické metody většinou stanovují sumu opiátů, kdy morfin je nejvýznamnějším z alkaloidů opia.

Hemaglutinační inhibice je založena na kompetici stabilizovaných erytrocytů s navázaným opiátem a opiátu ze vzorku o vazebná místa aglutinační protilátky. Inhibice aglutinace odpovídá koncentraci opiátů ve vzorku. Metoda nevyžaduje extrakci a je citlivá, ale nespecifická. Analýza trvá 1 h. Mez detekce je 560 nmol/l morfinu.

RIA specifická pro morfin musí nejdříve odstranit morfin-3-glukuronid extrakcí do chloroformu. Pak následuje kompetice (30 min, laboratorní teplota) mezi morfinem ze vzorku a morfinem značeným ¹²⁵I o vazebná místa na kozí protilátce. Pak se imunokomplex sráží 10 min sérem proti kozímu imunoglobulinu. Po centrifugaci a dekantaci se měří radioaktivita sraženiny 1 min gama-počítačem. Signál je nepřímo úměrný koncentraci morfinu. Rozsah měření je 35 – 350 nmol/l morfinu. Preciznost v sérii 1,1 – 2,1 %, mezi sériemi 2,6 – 4,4 %.

Homogenní enzymová imunoanalýza využívá myší monoklonální protilátky, které detekuji opiáty v moči na základě kompetice o daný počet specifických vazebných míst na protilátkách mezi drogou značenou enzymem a drogou v moči. Není-li droga ve vzorku přítomna, naváže se specifická protilátka na drogu značenou glukóza-6-fosfátdehydrogenázou (G6PDH) a dojde k inhibici aktivity enzymu. Toto uspořádání vytváří přímý vztah mezi koncentraci drogy v moči a enzymovou aktivitou. Enzymová aktivita G6PDH je stanovena spektrofotometricky při vlnové délce 340 nm / 412 nm měřením schopnosti přeměňovat NAD⁺ na NADH. Na základě čtyřbodové kalibrace (pětibodová EMIT metoda je velmi podobná) je měřicí rozsah metody 36,1 – 3505 nmol/l (po ředění 6x 155 – 21000 nmol/l). Při nastavení cut-off lze automaticky hodnotit výsledky jako pozitivní či negativní. Celková preciznost 1,3 – 2,8 %; zpětný výtěžek 90,2 – 106,9 %.

ELISA je kompetitivní postup na mikrotitračních destičkách, kdy soutěží morfin ze vzorku (ředěný fosfátovým pufrem) s morfinem značeným křenovou peroxidázou o vazebná místa polyklonální protilátky, která je zakotvená na stěnách jamek (60 min, laboratorní teplota, tma). Po imunoreakci jsou jamky promyty 6x a přidá se tetrametylbenzidin a vývoj barevné reakce (30 min, laboratorní teplota, tma) se zastaví stop činidlem. Měření probíhá při 450/650 nm do 1 h. Intenzita zbarvení je nepřímo úměrná koncentraci morfinu ve vzorku. Analytická citlivost metody je 3,5 nmol/l. Rozsah měření do 87,6 nmol/l. Specifita protilátky umožňuje se vyhnout extrakci před imunoreakcí. Přesnost v sérii je 9,43 – 12,83 %. Křížová reakce: kodein 3,3 %, morfin-3-glukuronid 2,5 %, ostatní ≤ 2 %.

FPIA (fluorescenční polarizační imunoanalýza) je kompetitivní homogenní postup. Vzorek zředěný fosfátovým pufrem se nechá reagovat s bílkovinným stabilizátorem a ovčí protilátkou vůči opiátům a indikátorem opiátů značeným fluoresceinem, který soutěží o vazebná místa protilátky. Polarizované světlo ze značeného imunokomplexu, který je velký a rotuje pomalu, bude mnohem větší, než z rychle rotujícího malého konjugátu. Intenzita fluorescence (excitace 485 nm, emise 525 – 550 nm) je nepřímo úměrná koncentraci opiátů ve vzorku. Na základě šestibodové kalibrace je rozsah metody 175 – 3505 nmol/l. Automatické ředění 3x umožňuje měřit koncentrace do 6300 nmol/l, vyšší koncentrace lze ředit manuálně. Při nastavení cut-off lze automaticky hodnotit výsledky jako pozitivní či negativní. Preciznost v sérii 3,13 -6,99 %, celkem 3,70 – 8,11 %; zpětný výtěžek 92,76 – 102,74 %. Při stanovení interferují deriváty morfinu, kodein a dihydrokodein. Neruší ikterus a hemolýza do 1,15 g hemoglobinu/l.

FRAT (free radical-labeled assay technique) je homogenní kompetitivní postup, který měří elektronovou spinovou rezonancí spin stabilního radikálu oxidu dusného, použitého jako marker drogy. Měří se energie absorbovaná nepárovými elektrony při přechodu ze základního do excitovaného stavu. Spektrum je špičaté, pokud je značená droga volná, a široké a ploché, když se značená droga váže na protilátku. Tedy čím více bude při kompetici o protilátku opiátu ve vzorku, tím bude amplituda spektra vyšší. Komerční soupravy vyžadovaly poměrně náročné detekční zařízení.

GC-MS začíná kyselou hydrolýzou s následnou extrakcí za přítomnosti pevného absorbentu. Po promytí kolony se morfin eluuje metanolem a eluát se odpaří. Na odparek se nechá působit N-metyl-N-(trimetylsilyl)trifluoracetamidem, aby se získal trimetylsilylderivát opiátů, který je analyzován GC/MS s využitím deuterovaných (D₃) derivátů morfinu a kodeinu jako vnitřních standardů. Citlivost metody je 1,75 nmol/l, preciznost 6,9 %. V případě použití samotné plynové chromatografie (po extrakci etylacetátem a derivatizaci trimetylsilylimidazolem) s detektorem elektronového záchytu je citlivost 0,35 nmol/l a preciznost 2 %.

HPLC-MS také využívá extrakce a separace (kolona C₁₈ s vodným roztokem acetonitrilu) s následnou oxidací ferrikyanidem draselným na fluoreskující dimer, který se stanovuje při 254 nm fluorescenčním detektorem (mez detekce 14 nmol/l, preciznost 6 %), nebo se dále vede do MS, kde se stanovuje (mez detekce 35 nmol/l, preciznost 6,9 %).

Moderní technologie využívá hmotnostní spektrometr s trojitým kvadrupólem a v tomto případě pro chromatografické dělení se používá gradientová chromatografie (voda-acetonitril, 50 °C) na 5 cm koloně ZORBAX C₁₈, kde dochází k rozdělení za 3,5 min. Celý cyklus, včetně detekce kationtů po elektrospreji, trvá 8 min. Detekční limit pro morfin je 3,5 nmol/l.

Referenčním standardem je morfinsulfát (čistota 99,9 %) a morfin-3β-D-glukuronid (čistota 99,5 %).

Droga snižuje hladiny v séru: enteroglukagon, gastrický inhibiční polypeptid, inzulin, kortizol, kyselina mléčná (o 50 %), motilin, noradrenalin, pankreatický polypeptid

Droga snižuje hladiny v moči: alkaloidy, 17-hydroxykortikosteroidy, 17-ketosteroidy, objem moče, vanilmandlová kyselina

Droga zvyšuje hladiny v séru: adrenalin, antidiuretický hormon, ALP, ALT, amoniak, AMS, AST, bilirubin, bromsulfaleinový test, CK, glukóza, gastrin, glykovaný hemoglobin, histamin, hydrogenkarbonát, LD, lipáza, pCO₂, prolaktin, TSH

Droga zvyšuje hladiny v moči: glukóza, AMS

Droga zvyšuje hladiny v likvoru: bílkoviny