|
Popis vyšetření: Vyšetření metylace genu SHOX2
Zařezeno v kategoriích: Synonyma:
short stature homeobox
Preanalytická fáze:
K vyšetření je vzorek z bronchoalveolární laváže nebo vzorek bioptický. Ze vzorku se následně izoluje DNA a provádí bisulfidická konverze nukleotidů s nemetylovaným cytosinem.
Poznámky k analytické metodě:
Cíl vyšetření: Vyšetření metylace v genu SHOX2 u osob s podezřením na karcinom plic. Přístup z OMIM katalogu (Online Mendelian Inheritance in Man): 602504 Při vyšetření CE-IVD soupravami se preferují založené na real-time PCR s hydrolyzačními sondami. Metoda real-time PCR s hydrolyzačními sondami: Reakční směsi pro real-time PCR obsahují specifické sondy. Ty jsou značeny na 5´- konci fluoroforem (např. FAM a JOE). Na 3´ konci sond je umístěn tzv. zhášeč (quencher). Při PCR je sonda hybridizována na příslušný DNA templát na základě komplementarity a poté hydrolyzována exonukleázovou aktivitou DNA polymerázy. Uvolněný fluorofor příslušného typu lze detekovat jako fluorescenční záření o specifické vlnové délce. Míra metylace podmiňuje pozitivní nebo negativní výsledek vyšetření. CE-IVD souprava by vždy měla obsahovat kontrolní vzorky s metylací a bez metylace.
Významné interference:
Nejsou udávány. |